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发明公开
一种高正变率菌种选育方法无效复审申请

公开(公告)号：CN102586222A

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN201210015119.7

申请日：2012-01-18

申请人： 石家庄学院

发明人： 李小兵 , 段书德 , 姚清国 , 李海龙

IPC分类号： C12N15/01 , C12N13/00 , C12R1/465 , C12R1/80

摘要： 本发明公开了一种消除中间产物代谢积累的高效菌种选育方法，步骤为：(1)LC/MS（液相/质谱联用）分析检测出发菌株的代谢产物，找到积累最多的途径中间产物，确定代谢途径中关键步骤的代谢抑制点；（2）通过色谱制备柱分离菌株的培养物，提取积累最多的途径中间产物；（3）对步骤（2）获得的途径中间产物，筛选其抗性/忍耐突变株，通过消除代谢途径中关键步骤的代谢抑制，消除中间产物的积累，更多地流向目的产物，从而筛选到高产菌株。本发明公开的菌种选育方法，从复杂的生物合成途径中找到关键步骤，消除其中间产物的代谢抑制和积累，从而提高菌株的合成能力，大大提高了筛选效率，具有方向性强、高正变率、提高幅度大、方法简单等优点，适合于所有微生物的选育，尤其适合于生物合成途径复杂的次级代谢产物的菌种选育。