公开(公告)号：CN112646840B

公开(公告)日：2022-11-18

申请号：CN202011565641.3

申请日：2020-12-25

申请人： 石河子大学

发明人： 陈创夫 ,  何金科 ,  邓肖玉 ,  王勇 ,  何延华

IPC分类号： C12N15/866 ,  C07K14/18 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14

摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，尤其涉及一种杆状病毒表达系统制备牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的方法及应用。将BVDV‑LC株E2基因连接至pFastBac1重组杆状病毒转移载体，在大肠杆菌中通过同源重组获得重组杆状病毒载体rBacmid‑E2，转染Sf9昆虫细胞后获得第一代重组杆状病毒P1，将P1代病毒继续感染Sf9昆虫细胞获得感染能力高的第二代重组杆状病毒P2，再将P2代病毒扩大培养后纯化得到E2蛋白。将本发明制备的E2蛋白作为诊断抗原和亚单位疫苗，能够表现出更好的优势，可以作为候选抗原进行疫苗和ELISA试剂盒的开发。

公开(公告)号：CN112646840A

公开(公告)日：2021-04-13

申请号：CN202011565641.3

申请日：2020-12-25

申请人： 石河子大学

发明人： 陈创夫 ,  何金科 ,  邓肖玉 ,  王勇 ,  何延华

IPC分类号： C12N15/866 ,  C07K14/18 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14

摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，尤其涉及一种杆状病毒表达系统制备牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的方法及应用。将BVDV‑LC株E2基因连接至pFastBac1重组杆状病毒转移载体，在大肠杆菌中通过同源重组获得重组杆状病毒载体rBacmid‑E2，转染Sf9昆虫细胞后获得第一代重组杆状病毒P1，将P1代病毒继续感染Sf9昆虫细胞获得感染能力高的第二代重组杆状病毒P2，再将P2代病毒扩大培养后纯化得到E2蛋白。将本发明制备的E2蛋白作为诊断抗原和亚单位疫苗，能够表现出更好的优势，可以作为候选抗原进行疫苗和ELISA试剂盒的开发。