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公开(公告)号：CN115851560A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202210922651.0
申请日：2022-08-02
申请人： 衢州益康园生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种提高软骨素‑4‑O‑磺基转移酶‑1表达效率及酶活的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过将分子伴侣与软骨素‑4‑O‑磺基转移酶‑1共表达，提高了酶的可溶性表达，可使人源磺基转移酶C4ST‑1的酶活提高至103.4U/L，在20mg/mL底物的情况下，硫酸化程度达到了72％。本发明还通过优化发酵条件，使得共表达分子伴侣TF的重组大肠杆菌软骨素‑4‑O‑磺基转移酶‑1的酶活提高到了128.5U/L，硫酸化效率达到了78.5％，实现了磺基转移酶酶活的大幅度提高，并且不影响酶的结构与后续纯化，为酶法生产硫酸软骨素提供了有效方法。
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公开(公告)号：CN115851560B
公开(公告)日：2024-08-20
申请号：CN202210922651.0
申请日：2022-08-02
申请人： 衢州益康园生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种提高软骨素‑4‑O‑磺基转移酶‑1表达效率及酶活的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过将分子伴侣与软骨素‑4‑O‑磺基转移酶‑1共表达，提高了酶的可溶性表达，可使人源磺基转移酶C4ST‑1的酶活提高至103.4U/L，在20mg/mL底物的情况下，硫酸化程度达到了72％。本发明还通过优化发酵条件，使得共表达分子伴侣TF的重组大肠杆菌软骨素‑4‑O‑磺基转移酶‑1的酶活提高到了128.5U/L，硫酸化效率达到了78.5％，实现了磺基转移酶酶活的大幅度提高，并且不影响酶的结构与后续纯化，为酶法生产硫酸软骨素提供了有效方法。
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公开(公告)号：CN115895987B
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202210922706.8
申请日：2022-08-02
申请人： 衢州益康园生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种提高果糖软骨素产量的重组菌株及其构建方法，属于生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌基因组上强化合成UDP‑乙酰氨基半乳糖胺路径的关键酶氨基转移酶glmS和磷酸葡萄糖胺变位酶glmM的编码基因，在解决质粒不稳定等问题的同时，提高了果糖软骨素的产量，使摇瓶发酵条件下的果糖软骨素的产量从90mg/L提高至245mg/L，在7.5L发酵罐发酵的产量达到7.12g/L，为后续的工业化奠定了基础。
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公开(公告)号：CN115895987A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202210922706.8
申请日：2022-08-02
申请人： 衢州益康园生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种提高果糖软骨素产量的重组菌株及其构建方法，属于生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌基因组上强化合成UDP‑乙酰氨基半乳糖胺路径的关键酶氨基转移酶glmS和磷酸葡萄糖胺变位酶glmM的编码基因，在解决质粒不稳定等问题的同时，提高了果糖软骨素的产量，使摇瓶发酵条件下的果糖软骨素的产量从90mg/L提高至245mg/L，在7.5L发酵罐发酵的产量达到7.12g/L，为后续的工业化奠定了基础。
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