公开(公告)号：CN110839614A

公开(公告)日：2020-02-28

申请号：CN201911183500.2

申请日：2019-11-27

申请人： 西南医科大学

发明人： 纪慧娇 ,  肖占刚 ,  赵曰水 ,  钟鲜梅 ,  鲁道源

IPC分类号： A01N1/02

摘要： 本发明公开了一种自体脐带间充质干细胞冻存液及其制备和冻存方法，冻存液由配合使用的A液和B液组成，A液与B液的体积比为6-9:1-3；所述A液按照体积份数计，包括如下成分：65-75份含预添加物的基础培养基；预添加物与基础培养基的比为7-12mg：0.6-0.9mL；其中，预添加物按重量份数计，包括：4-6份巴戟天醇提取物、0.13-0.16份Ⅰ型胶原、0.05-0.15份透明质酸钠和3-5份硫辛酸；所述B液按照体积份数计，包括如下成分：15-25份自体血清。使用本发明的冻存液能够在新生儿分娩时同步获得足量的血液用于分离自体血清，从而有效避免异种异体来源的血清蛋白污染，同时模拟细胞外基质微环境，提高细胞复苏存活率，从而有利于其在生物样本库标准化操作和临床细胞治疗中的应用。

公开(公告)号：CN110839614B

公开(公告)日：2022-02-11

申请号：CN201911183500.2

申请日：2019-11-27

申请人： 西南医科大学

发明人： 纪慧娇 ,  肖占刚 ,  赵曰水 ,  钟鲜梅 ,  鲁道源

IPC分类号： A01N1/02

摘要： 本发明公开了一种自体脐带间充质干细胞冻存液及其制备和冻存方法，冻存液由配合使用的A液和B液组成，A液与B液的体积比为6‑9:1‑3；所述A液按照体积份数计，包括如下成分：65‑75份含预添加物的基础培养基；预添加物与基础培养基的比为7‑12mg：0.6‑0.9mL；其中，预添加物按重量份数计，包括：4‑6份巴戟天醇提取物、0.13‑0.16份Ⅰ型胶原、0.05‑0.15份透明质酸钠和3‑5份硫辛酸；所述B液按照体积份数计，包括如下成分：15‑25份自体血清。使用本发明的冻存液能够在新生儿分娩时同步获得足量的血液用于分离自体血清，从而有效避免异种异体来源的血清蛋白污染，同时模拟细胞外基质微环境，提高细胞复苏存活率，从而有利于其在生物样本库标准化操作和临床细胞治疗中的应用。

公开(公告)号：CN112779218B

公开(公告)日：2022-12-06

申请号：CN202110124321.2

申请日：2021-01-29

申请人： 西南医科大学

发明人： 肖占刚 ,  赵曰水 ,  邓健 ,  文庆莲 ,  李静 ,  杜富宽 ,  余静

IPC分类号： C12N5/0787

摘要： 本发明公开了一种用于原代培养肿瘤浸润性肥大细胞的培养基及培养方法，该培养基包括以下组分：0.05‑1v％PVA、0.5‑2v％ITSX、80‑120U/mL penicillin、0.05‑1mg/mL streptomycin、50‑60μM/L 2‑mercaptoethanol、80‑120ng/mL SCF、80‑120ng/mL IL‑6，余量为IMDM培养基。培养方法包括以下步骤：S1.清洗新鲜肿瘤组织，然后切成2‑4mm3的小块；S2.将S1所得组织块制为单细胞悬液，然后加入CD117+免疫磁珠孵育，洗涤细胞，离心并重悬，通过免疫磁珠分选系统分选出肥大细胞；S3.将S2所得肥大细胞重悬于该用于原代培养肿瘤浸润性肥大细胞的培养基中，然后转移至孔板，于37℃，5％CO2培养箱进行培养，每周进行2‑3次半量换液，即可。采用本发明方法扩增肥大细胞的效率显著提高，同时成本显著降低。

公开(公告)号：CN110643574A

公开(公告)日：2020-01-03

申请号：CN201911044963.0

申请日：2019-10-30

申请人： 西南医科大学

发明人： 肖占刚 ,  赵曰水 ,  俞静 ,  文庆莲 ,  李静

IPC分类号： C12N5/0783 ,  C12N15/01

摘要： 本发明公开了一种用于肿瘤浸润性淋巴细胞快速培养的饲养细胞的制备方法，本发明所用技术为利用丝裂霉素C来处理外周血淋巴细胞得到饲养细胞，然后用饲养细胞与预培养的肿瘤浸润性淋巴细胞进行共培养。采用本发明的方法制作的饲养细胞扩增肿瘤浸润性淋巴细胞的效率与利用γ射线照射制作的饲养细胞扩增肿瘤浸润性淋巴细胞的效率相比效果更好，同时利用此法的成本显著降低。本发明方法制备方法简单易行，可以广泛推广应用。

公开(公告)号：CN112779218A

公开(公告)日：2021-05-11

申请号：CN202110124321.2

申请日：2021-01-29

申请人： 西南医科大学

发明人： 肖占刚 ,  赵曰水 ,  邓健 ,  文庆莲 ,  李静 ,  杜富宽 ,  余静

IPC分类号： C12N5/0787

摘要： 本发明公开了一种用于原代培养肿瘤浸润性肥大细胞的培养基及培养方法，该培养基包括以下组分：0.05‑1v％PVA、0.5‑2v％ITSX、80‑120U/mL penicillin、0.05‑1mg/mL streptomycin、50‑60μM/L 2‑mercaptoethanol、80‑120ng/mL SCF、80‑120ng/mL IL‑6，余量为IMDM培养基。培养方法包括以下步骤：S1.清洗新鲜肿瘤组织，然后切成2‑4mm3的小块；S2.将S1所得组织块制为单细胞悬液，然后加入CD117+免疫磁珠孵育，洗涤细胞，离心并重悬，通过免疫磁珠分选系统分选出肥大细胞；S3.将S2所得肥大细胞重悬于该用于原代培养肿瘤浸润性肥大细胞的培养基中，然后转移至孔板，于37℃，5％CO2培养箱进行培养，每周进行2‑3次半量换液，即可。采用本发明方法扩增肥大细胞的效率显著提高，同时成本显著降低。

公开(公告)号：CN112458171A

公开(公告)日：2021-03-09

申请号：CN202011353407.4

申请日：2020-11-27

申请人： 西南医科大学

发明人： 肖占刚 ,  杜富宽 ,  赵曰水 ,  沈晶 ,  马永顺 ,  张瑶 ,  吴旭 ,  李明星

IPC分类号： C12Q1/6886 ,  G01N33/574 ,  C12N15/11 ,  G16B15/30 ,  G16B20/30 ,  G16B40/20

摘要： 本发明公开了一种预测宫颈鳞癌化疗疗效的标志物及其筛选方法和应用。该标志物为SRSF7、SNRPB、SNRPA、SF3A2和PQBP1基因中的至少一种。一种检测预测宫颈鳞癌化疗疗效标志物的试剂在制备用于预测宫颈鳞癌基于顺铂联合放化疗效果的产品中的应用，该试剂为检测SRSF7、SNRPB、SNRPA、SF3A2或PQBP1基因频率或表达水平的试剂。本发明筛选得到的基因可以准确的将放化疗有反应者和无反应患者区分开来，利用所述基因可辅导患者选择不同的治疗方式。