一种脐带血淋巴细胞制剂的制备方法

    公开(公告)号:CN114438027A

    公开(公告)日:2022-05-06

    申请号:CN202210190947.8

    申请日:2022-02-28

    摘要: 本发明涉及免疫系统技术领域,具体涉及一种脐带血淋巴细胞制剂的制备方法,通过免疫细胞与干细胞进行共培养,能够诱导淋巴细胞与脐带血间充质干细胞、脐带血淋巴细胞进行相互作用,淋巴细胞能够促进脐带血淋巴细胞分泌细胞因子,且脐带血淋巴细胞具有较好的增殖分化的作用,从而能够提高活性细胞因子的产,且脐带血淋巴细胞为未分化的淋巴细胞,其活性较强,分泌活性细胞因子的能力也较强,因此提取得到的细胞因子的活性相较于成体的外周淋巴细胞更好,且通过脐带血淋巴细胞能够对淋巴细胞进行调节,能够减少炎性细胞因子的数量。

    一种改良的微载体活细胞荧光染色方法

    公开(公告)号:CN111175112A

    公开(公告)日:2020-05-19

    申请号:CN202010033848.X

    申请日:2020-01-13

    IPC分类号: G01N1/30

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种利用微载体技术培养细胞的活细胞荧光染色方法,用来鉴定微载体上细胞的活性。本发明在染色前加入细胞膜通透剂triton X-100以增强细胞通透性,促进染料进入细胞内与核酸结合;染色时,采用无血清培养基作为缓冲液,配制钙黄绿素-乙酸甲基酯(Caclein-AM)活细胞染色液,更接近细胞生长环境,防止细胞脱落;染色后,加入抗荧光衰减剂DABCO即1,4-二偶氮双环[2,2,2]-辛烷,有效延长发荧光的时间,从而使检测结果更精准。使用该方法可以根据发绿色荧光的强度判断出微载体上贴壁细胞的活性大小,同时不影响细胞的生长。

    细胞活性检测微毒性染色剂
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN111077003A

    公开(公告)日:2020-04-28

    申请号:CN201911186128.0

    申请日:2019-11-28

    IPC分类号: G01N1/30

    摘要: 本发明公开了一种细胞活性检测微毒性染色剂,包括以下组分和配比:乳酸4-8 wt%;亚甲基蓝0.05-3 wt%;硫酸钠3-8 wt%;叶酸衍生物16-18 wt%;抗坏血酸0.5-7.5 wt%;果糖3-15 wt%;余量为去离子水。本发明的细胞活性检测微毒性染色剂毒性非常的小,不会影响操作者的健康,成本低且染色效果好,充分满足了生物实验的需要,具有广阔的应用前景。

    一种毛囊干细胞(ORSC)制剂及其在神经损伤中的应用

    公开(公告)号:CN114470164A

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202210186638.3

    申请日:2022-02-28

    发明人: 陈锦阳

    摘要: 本发明提供一种毛囊干细胞(ORSC)制剂及其在神经损伤中的应用,包括一种毛囊干细胞(ORSC)制剂,该毛囊干细胞(ORSC)制剂包括组分:PBS缓冲液、毛囊干细胞、海藻糖溶液、复合分化诱导剂、生长因子、增殖抑制剂。本发明涉及一种毛囊干细胞(ORSC)制剂,该制剂内添加有海藻糖溶液、复合分化诱导剂、生长因子及增殖抑制剂:海藻糖溶液在细胞表面形成保护膜,用于保持毛囊干细胞在生命机体环境内的存活率,注射后不易被生命机体清除;复合分化诱导剂和生长因子相配合用于毛囊干细胞定向分化成神经细胞;增殖抑制剂通过抑制细胞周期的进程起到抑制损伤处普通的细胞增殖,提高毛囊干细胞的分化率。

    细胞活性检测模拟生理环境缓冲剂

    公开(公告)号:CN111019997A

    公开(公告)日:2020-04-17

    申请号:CN201911096372.8

    申请日:2019-11-11

    发明人: 陈锦阳 庄盼 袁博

    IPC分类号: C12Q1/02 C12N5/00

    摘要: 本发明公开了一种细胞活性检测模拟生理环境缓冲剂,包括以下组分:无机盐、缓冲剂、氨基酸、葡萄糖。所述无机盐包括氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钾、碳酸氢钠。所述氨基酸包括L-精氨酸、L-门冬氨酸、L-谷氨酸、甘氨酸、L-组氨酸、L-羟脯氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸。所述缓冲剂为4-羟乙基哌嗪乙磺酸。本发明的细胞活性检测模拟生理环境缓冲剂无毒性,细胞能够很好的保持数量、质量及生物学特性的完整性,充分满足了生物实验的需要,具有广阔的应用前景。

    毛囊源细胞培养基
    7.
    发明公开

    公开(公告)号:CN110923197A

    公开(公告)日:2020-03-27

    申请号:CN201911095358.6

    申请日:2019-11-11

    IPC分类号: C12N5/074

    摘要: 本发明公开了一种毛囊源细胞培养基,包括以下组分和配比:血清替代物 2-15 v/v%;复合维生素 20-90 ug/ml;氨基酸 20-30 ng/ml;细胞生长因子 1.5-9 ng/ml;L-谷氨酰胺 3-7 mmol/ml;青链霉素双抗溶液 12-18μM;羟基乙醇 18-25μM;壳聚糖 5-10μg/ml;倍他米松 10-15 ng/ml;余量为DMEM/F12培养基。通过本发明培养基培养的毛囊源细胞增长快速,生长稳定,纯度高,安全性高,为毛囊源细胞施用于治疗皮肤缺损奠定了基础,具有很好的临床应用前景。

    毛囊干细胞制备方法
    8.
    发明公开

    公开(公告)号:CN110904033A

    公开(公告)日:2020-03-24

    申请号:CN201911089052.X

    申请日:2019-11-08

    IPC分类号: C12N5/074

    摘要: 本发明公开了一种毛囊干细胞制备方法,包括以下步骤:剪取志愿者头发毛囊根部,清洗后,加入0.25% Dispase酶,37℃消化0.5-1.5h;酶消化后,接种于毛囊干细胞培养基中,培养条件为37℃、5% CO2,每1-2d换液一次;毛囊干细胞的扩增:将步骤S2获得的毛囊干细胞转接到毛囊干细胞扩增培养基中继续培养;所述毛囊干细胞扩增培养基包括以下组分:DMEM基础培养基、FBS、T-β、hEGF、VEGF以及Rho相关激酶;毛囊干细胞的纯化。通过本发明方法制备的毛囊干细胞能够长期体外传代培养,并且具有很高的再生和分化能力为毛囊干细胞施用于治疗皮肤缺损奠定了基础,具有很好的临床应用前景。

    一种用茶皂素溶解月经血红细胞分离宫膜间充质干细胞的方法

    公开(公告)号:CN109182263A

    公开(公告)日:2019-01-11

    申请号:CN201811117472.X

    申请日:2018-09-20

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明涉及一种用茶皂素溶解月经血红细胞分离宫膜间充质干细胞的方法,包括如下步骤:(1)试剂配制:配置茶皂素溶液;(2)获得细胞沉淀:将月经血样品过滤,离心除去上层血浆,获得细胞沉淀A;向细胞沉淀A中加入茶皂素溶液,充分混合均匀,静置后离心去除上清液,获得细胞沉淀B;(3)细胞培养:将细胞沉淀B用细胞培养液悬浮于培养箱中贴壁培养,收集第3代细胞,即为宫膜间充质干细胞。本发明方法采用茶皂素,不对目的细胞造成损伤即可得到除传统方法得到的单个核以外的宫膜组织,可从月经血中快速高效分离提取单个核细胞和宫膜组织诱导获得宫膜间充质干细胞,且数量是传统白膜层的数倍。

    一种纳米囊泡保存液及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118872661A

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202410908780.3

    申请日:2024-07-08

    IPC分类号: A01N1/02

    摘要: 本发明提供一种纳米囊泡保存液及其制备方法和应用,属于纳米囊泡保存液技术领域。本发明的纳米囊泡保存液包括20‑100mM渗透压稳定剂、3‑5mM糖类物质、1‑8mM还原剂、50‑100mM电解质溶液、30‑50mM氨基酸,1‑2%(w/v)蛋白质稳定剂,5‑10mM缓冲剂;纳米囊泡保存液的渗透压为320‑340mOsm/L,pH值为7.2‑7.4,含有适量的抗生素以确保无菌状态。本发明的保存液主要精确控制渗透压稳定剂、糖类物质、还原剂、电解质溶液、氨基酸等成分的配比,并添加适量的蛋白质稳定剂和缓冲剂,确保在冷藏条件下维持纳米囊泡的完整性和活性,具有更好的纳米囊泡保护效果和更高的纳米囊泡存活率,适用于不同来源的纳米囊泡保存需求。