一种毛囊外根鞘细胞培养基

    公开(公告)号:CN114350596B

    公开(公告)日:2023-11-10

    申请号:CN202210145904.8

    申请日:2022-02-17

    发明人: 陈锦阳

    IPC分类号: C12N5/071

    摘要: 本发明提供了一种毛囊外根鞘细胞培养基,以DMEM/F‑12为基础培养基,包含以下含量的组分:人参皂苷40‑60μg/mL、黄芪多糖20‑90μg/mL、表皮生长因子0.1‑6ng/mL、纤维生长因子16‑20ng/mL、氢化可的松0.1‑10μg/mL、转铁蛋白9‑15μg/mL、壳聚糖4‑9μg/mL、烟酰胺1‑7μg/mL。本发明提供的一种毛囊外根鞘细胞培养基,添加的人参皂苷和黄芪多糖具有协同作用,能够显著提高毛囊外根鞘细胞的再生和分化能力,表皮生长因子和纤维生长因子的加入可以进一步促进毛囊外根鞘细胞的分裂、繁殖和生长分化。

    一种毛囊组织玻璃化冻存液

    公开(公告)号:CN114946829B

    公开(公告)日:2023-11-03

    申请号:CN202210358889.5

    申请日:2022-04-06

    发明人: 陈锦阳

    IPC分类号: A01N1/02

    摘要: 本发明提供一种毛囊组织玻璃化冻存液,包括以下体积百分数的组分:18%‑25%的二甲基亚砜,12%‑18%的乙酰胺,3%‑6%的1,2‑丙二醇,3%‑8%的2,3‑丁二醇,5%‑7%的聚乙二醇,1‑5%右旋糖酐,10%胎牛血清FBS,余量为平衡缓冲液;所述的毛囊组织玻璃化冻存液中还包括有0.2‑0.9g/ml的海藻糖;所有组分的体积百分数总和为100%。本发明的毛囊组织玻璃化冻存液在进行冻存毛囊组织时减少冰晶的形成,从而有效防止毛囊组织细胞冻伤,提高毛囊组织细胞冷冻保存的存活率,内含有胎牛血清FBS和右旋糖酐配合使用,在冷冻时以及解冻后及时提供相应的营养物质和生存环境,可以提高解冻时的存活率,使得解冻后的毛囊组织细胞复苏率高。

    一种维持和恢复毛乳头细胞干性的外泌体制剂

    公开(公告)号:CN109439614B

    公开(公告)日:2023-10-03

    申请号:CN201811519885.0

    申请日:2018-12-12

    IPC分类号: C12N5/071 C12N5/0783

    摘要: 本发明公开了一种维持和恢复毛乳头细胞干性的外泌体制剂,该制剂通过以下方法制得:1)DPC的分离获取;2)外周血单个核细胞的分离;3)CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞筛选;4)CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞条件培养基的获取;5)DPC诱导培养基的配置;6)DPC的诱导培养;7)外泌体制剂的制备。该方法避免CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在直接应用(细胞移植)中的免疫排斥和替代方法(transwell)中的共培养成本费用高的问题,在DPC培养中能回复高代次毛乳头的细胞干性。

    一种用于治疗斑秃的外泌体混合物

    公开(公告)号:CN114392303B

    公开(公告)日:2023-08-29

    申请号:CN202210149101.X

    申请日:2022-02-17

    发明人: 陈锦阳

    摘要: 本发明提供一种用于治疗斑秃的外泌体混合物,由毛囊干细胞外泌体溶液和中药组合物按照1:(20‑40)的重量比混合制备而成。本发明的外泌体混合物是由毛囊干细胞外泌体溶液配合相应的中药组合物混合制成,外泌体混合物中含有毛囊干细胞外泌体,将其擦附在头皮上,其渗透到毛囊细胞中后,内部所含有的生长因子可以提升毛囊细胞的活性,从而快速生发和增加毛发的粗细,有效的治疗斑秃、预防脱发;且在相应的中药成分的辅助下,尽快的渗入到毛囊细胞中,从而促进毛囊细胞进形增殖和生长,从而快速的使得毛囊细胞恢复活性,进而快速解决斑秃、脱发等问题。

    一种改良的微载体活细胞荧光染色方法

    公开(公告)号:CN111175112A

    公开(公告)日:2020-05-19

    申请号:CN202010033848.X

    申请日:2020-01-13

    IPC分类号: G01N1/30

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种利用微载体技术培养细胞的活细胞荧光染色方法,用来鉴定微载体上细胞的活性。本发明在染色前加入细胞膜通透剂triton X-100以增强细胞通透性,促进染料进入细胞内与核酸结合;染色时,采用无血清培养基作为缓冲液,配制钙黄绿素-乙酸甲基酯(Caclein-AM)活细胞染色液,更接近细胞生长环境,防止细胞脱落;染色后,加入抗荧光衰减剂DABCO即1,4-二偶氮双环[2,2,2]-辛烷,有效延长发荧光的时间,从而使检测结果更精准。使用该方法可以根据发绿色荧光的强度判断出微载体上贴壁细胞的活性大小,同时不影响细胞的生长。

    细胞活性检测微毒性染色剂
    6.
    发明公开

    公开(公告)号:CN111077003A

    公开(公告)日:2020-04-28

    申请号:CN201911186128.0

    申请日:2019-11-28

    IPC分类号: G01N1/30

    摘要: 本发明公开了一种细胞活性检测微毒性染色剂,包括以下组分和配比:乳酸4-8 wt%;亚甲基蓝0.05-3 wt%;硫酸钠3-8 wt%;叶酸衍生物16-18 wt%;抗坏血酸0.5-7.5 wt%;果糖3-15 wt%;余量为去离子水。本发明的细胞活性检测微毒性染色剂毒性非常的小,不会影响操作者的健康,成本低且染色效果好,充分满足了生物实验的需要,具有广阔的应用前景。

    一种同时敲除KRAS基因和EGFR基因的CRISPR‑Cas9系统及其应用

    公开(公告)号:CN107130000A

    公开(公告)日:2017-09-05

    申请号:CN201710332598.8

    申请日:2017-05-12

    发明人: 陈锦阳 邓兆群

    摘要: 本发明公开一种同时敲除KRAS基因和EGFR基因的CRISPR‑Cas9系统,包括特异性靶向KRAS基因的sgRNA,对应的DNA序列如SEQ ID NO.1或/和SEQ ID NO.2所示,和特异性靶向EGFR基因的sgRNA,对应的DNA序列如SEQ ID NO.11或/和SEQ ID NO.12所示。本发明还公开了其在制备治疗癌症药物中的应用。本发明CRISPR‑Cas9系统可同时高效敲除在肺癌中高度表达的两个癌症驱动因子KRAS及EGFR,该系统操作简单,敲除效率高,有望在肺癌的治疗中得到应用。本发明系统适用于EGFR和KRAS异常表达的多种癌症。

    一种毛囊干细胞(ORSC)制剂及其在神经损伤中的应用

    公开(公告)号:CN114470164A

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202210186638.3

    申请日:2022-02-28

    发明人: 陈锦阳

    摘要: 本发明提供一种毛囊干细胞(ORSC)制剂及其在神经损伤中的应用,包括一种毛囊干细胞(ORSC)制剂,该毛囊干细胞(ORSC)制剂包括组分:PBS缓冲液、毛囊干细胞、海藻糖溶液、复合分化诱导剂、生长因子、增殖抑制剂。本发明涉及一种毛囊干细胞(ORSC)制剂,该制剂内添加有海藻糖溶液、复合分化诱导剂、生长因子及增殖抑制剂:海藻糖溶液在细胞表面形成保护膜,用于保持毛囊干细胞在生命机体环境内的存活率,注射后不易被生命机体清除;复合分化诱导剂和生长因子相配合用于毛囊干细胞定向分化成神经细胞;增殖抑制剂通过抑制细胞周期的进程起到抑制损伤处普通的细胞增殖,提高毛囊干细胞的分化率。

    细胞活性检测模拟生理环境缓冲剂

    公开(公告)号:CN111019997A

    公开(公告)日:2020-04-17

    申请号:CN201911096372.8

    申请日:2019-11-11

    发明人: 陈锦阳 庄盼 袁博

    IPC分类号: C12Q1/02 C12N5/00

    摘要: 本发明公开了一种细胞活性检测模拟生理环境缓冲剂,包括以下组分:无机盐、缓冲剂、氨基酸、葡萄糖。所述无机盐包括氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钾、碳酸氢钠。所述氨基酸包括L-精氨酸、L-门冬氨酸、L-谷氨酸、甘氨酸、L-组氨酸、L-羟脯氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸。所述缓冲剂为4-羟乙基哌嗪乙磺酸。本发明的细胞活性检测模拟生理环境缓冲剂无毒性,细胞能够很好的保持数量、质量及生物学特性的完整性,充分满足了生物实验的需要,具有广阔的应用前景。