公开(公告)号：EP0911388A3

公开(公告)日：2003-11-26

申请号：EP98111599.1

申请日：1998-06-24

申请人： GSF-Forschungszentrum für Umwelt und Gesundheit GmbH

发明人： Staege, Martin S., Dr. ,  Kempkes, Bettina, Dr. ,  Bornkamm, Georg W., Prof. Dr. ,  Hammerschmidt, Wolfgang, Dr. ,  Zimber-Strobl, Ursula, Dr. ,  Polack, Axel, Dr.

IPC分类号： C12N1/36 ,  C12N5/06 ,  C12N5/10

CPC分类号： C12N5/0636 ,  A61K2039/5158 ,  C12N2501/52 ,  C12N2502/11 ,  C12N2510/04

摘要： Die Erfindung beschreibt Verfahren zur Stimulation von T-Zellen mit gewünschter Antigenspezifität, wobei ein bevorzugtes Verfahren die nachfolgenden Schritte aufweist: (a) Einführen von Immortalisierungs-Genen in antigenpräsentierende Zellen (APC) in solcher Weise, daß zumindest die Expression und/oder Funktion zumindest eines dieser Gene regulierbar ist, um konditional immortalisierte antigenpräsentierende Zellen zu erhalten; (b) Einführen eines für das gewünschte Antigen kodierenden Gens in die im Schritt (a) erhaltenen immortalisierten Zellen in solcher Weise, daß das Antigen zumindest auch nach dem Stop der Expression und/oder der Aufhebung der Funktion zumindest eines der Immortalisierungsgene exprimierbar ist; (c) Expansion der immortalisierten antigenpräsentierenden Zellen durch Expression der Immortalisierungsgene und/oder durch funktionelle Aktivierung der Immortalisierungsgene; (d) Beendigung der Proliferation der immortalisierten antigenpräsentierenden Zellen durch Stop der Expression und/oder durch Aufhebung der Funktion zumindest eines der regulierbaren Immortalisierungsgene; (e) fortgesetzte Expression des Antigens; (f) Zugabe leukozytärer Zellen, die zumindest T-Zellen enthalten, und Kultivierung des Zellgemisches zur Stimulation der gegen das gewünschte Antigen gerichteten T-Zellen; (g) wahlweise Aufreinigung und Isolierung der stimulierten T-Zellen.

公开(公告)号：EP0911388A2

公开(公告)日：1999-04-28

申请号：EP98111599.1

申请日：1998-06-24

申请人： GSF-Forschungszentrum für Umwelt und Gesundheit, GmbH

发明人： Staege, Martin S., Dr. ,  Kempkes, Bettina, Dr. ,  Bornkamm, Georg W., Prof. Dr. ,  Hammerschmidt, Wolfgang, Dr. ,  Zimber-Strobl, Ursula, Dr. ,  Polack, Axel, Dr.

IPC分类号： C12N1/36 ,  C12N5/06 ,  C12N5/10

CPC分类号： C12N5/0636 ,  A61K2039/5158 ,  C12N2501/52 ,  C12N2502/11 ,  C12N2510/04

摘要： Die Erfindung beschreibt Verfahren zur Stimulation von T-Zellen mit gewünschter Antigenspezifität, wobei ein bevorzugtes Verfahren die nachfolgenden Schritte aufweist:

(a) Einführen von Immortalisierungs-Genen in antigenpräsentierende Zellen (APC) in solcher Weise, daß zumindest die Expression und/oder Funktion zumindest eines dieser Gene regulierbar ist, um konditional immortalisierte antigenpräsentierende Zellen zu erhalten;
(b) Einführen eines für das gewünschte Antigen kodierenden Gens in die im Schritt (a) erhaltenen immortalisierten Zellen in solcher Weise, daß das Antigen zumindest auch nach dem Stop der Expression und/oder der Aufhebung der Funktion zumindest eines der Immortalisierungsgene exprimierbar ist;
(c) Expansion der immortalisierten antigenpräsentierenden Zellen durch Expression der Immortalisierungsgene und/oder durch funktionelle Aktivierung der Immortalisierungsgene;
(d) Beendigung der Proliferation der immortalisierten antigenpräsentierenden Zellen durch Stop der Expression und/oder durch Aufhebung der Funktion zumindest eines der regulierbaren Immortalisierungsgene;
(e) fortgesetzte Expression des Antigens;
(f) Zugabe leukozytärer Zellen, die zumindest T-Zellen enthalten, und Kultivierung des Zellgemisches zur Stimulation der gegen das gewünschte Antigen gerichteten T-Zellen;
(g) wahlweise Aufreinigung und Isolierung der stimulierten T-Zellen.

摘要翻译： 本发明描述了用于T细胞具有期望的抗原特异性的刺激方法，优选的方法包括以下步骤：以这样的方式在抗原呈递细胞（APC）（a）将永生化的基因的至少所述表达和/或功能的至少 这些基因中的一个可以被控制，以获得条件永生化的抗原呈递细胞; （B）将在步骤编码所需抗原基因的基因（a）中得到的以这样的方式使抗原甚至停止的永生化的基因中的至少一个的函数的表达式和/或废除之后是至少可表达的永生化细胞; （C）由永生化的基因和/或由永生化的基因的功能性活化的表达扩大永生化的抗原呈递细胞; （D）通过停止表达和/或废除可控永生化基因中的至少一个的功能完成永生化的抗原呈递细胞的增殖; （E）继续所述抗原的表达; （F）将含有至少T细胞白细胞的细胞，并培养所述细胞混合物以刺激针对所需抗原的T细胞; （G）任选地纯化和分离所刺激的T细胞。