公开(公告)号：EP0506963A1

公开(公告)日：1992-10-07

申请号：EP91900328.0

申请日：1990-12-18

申请人： Takeda Chemical Industries, Ltd.

发明人： KITANO, Kazuaki ,  KURIYAMA, Masato ,  NISHIMURA, Osamu ,  IGARASHI, Koichi

IPC分类号： C12N1 ,  C07K1 ,  C07K14 ,  C12N15 ,  C12P21 ,  A61K38 ,  C12R1

CPC分类号： C07K14/503 ,  A61K38/00 ,  C12N15/67

摘要： On décrit (1) un vecteur comprenant une séquence nucléotidique codant pour une mutéine dans laquelle au moins un constituant aminoacide du facteur mûr de croissance fibroblastique basique de l'homme (hbFGF) est remplacé par un autre aminoacide, ainsi qu'un promoteur T7 situé en amont de ladite séquence; (2) un transformant transformé par le vecteur de (1); (3) le transformant de (2), dans lequel un hôte est E. coli ayant un gène de polymérase d'ARN T7 en aval d'un promoteur de laque; (4) un procédé de production de la mutéine dans laquelle au moins un constituant aminoacide du hbFGF mûr est remplacé par un autre aminoacide, consistant à cultiver le transformant de (2) dans un milieu de culture; (5) le procédé de (4), selon lequel l'on ajoute au milieu de culture de 3 à 500 mum d'isopropylthiogalactopyranoside dans une phase exponentielle de croissance du transformant de (3), puis on effectue la culture; et (6) le procédé de (5), selon lequel l'on purifie par chromatographie une solution résultante contenant de la mutéine à l'aide d'un sulfate de polysaccharide réticulé, d'un polymère synthétique possédant un groupe d'acide sulfonique en tant que groupe échangeur et/ou d'un polymère synthétique de filtration par gel servant de porteur, la mutéine de hbFGF à activité biologique pouvant ainsi être efficacement obtenue.