公开(公告)号：US06699670B2

公开(公告)日：2004-03-02

申请号：US10085134

申请日：2002-03-01

申请人： Richard Eric Rothman ,  Samuel Yang ,  Shin Lin ,  Gabor David Kelen

发明人： Richard Eric Rothman ,  Samuel Yang ,  Shin Lin ,  Gabor David Kelen

IPC分类号： C12Q168

CPC分类号： C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2565/102 ,  C12Q2537/143

摘要： An adaptation of the real-time PCR assay allows for highly sensitive detection of any eubacterial species with simultaneous speciation. The assay relies on a ‘multiprobe’ design in which a single set of highly conserved sequences encoded by the 16S rRNA gene serves as the primer pair, and it is used in combination with both an internal highly conserved sequence, the universal probe, and an internal variable region, the species-specific probe. A pre-PCR ultrafiltration step can be used to effectively decontaminate or remove background DNA. The real-time system reliably identifies 14 common bacterial species with a detection limit of 50 fg.

摘要翻译： 实时PCR测定的适应性允许对具有同时形态的任何真细菌物种进行高度敏感的检测。 该测定依赖于“多探针”设计，其中由16S rRNA基因编码的单组高度保守序列用作引物对，并且其与内部高度保守序列，通用探针和 内部可变区，物种特异性探针。 可以使用预PCR超滤步骤来有效地净化或除去背景DNA。 实时系统可靠地识别14种常见细菌，检出限为50 fg。