转基因抗旱大豆土壤环境安全评价方法
摘要:
本发明提供一种转基因抗旱大豆土壤环境安全评价方法。分别取转基因抗旱大豆根系和同一品种非转基因大豆根系100g匀浆后过滤,低温冷冻离心机4000g下离心后取上清液置于4℃冰箱中保存备用。针对每种功能微生物和病原微生物分别配制适合其生长的选择性培养基,在各选择性培养基中分别添加上述转基因抗旱大豆根系和同一品种非转基因大豆根系提取物0,1%,0.1%,0.01%,0.001%,0.0001%后倒平板,5次重复。在倒平板后的每种不同的选择性培养集中分别接种功能微生物如固氮菌、硅酸盐细菌、木霉、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等和大豆根部病原菌如疫霉菌。28℃~30℃条件下培养5~7天后测定各平板培养基中功能微生物和病原微生物菌落直径,比对各功能菌和病原菌在含有转基因抗旱大豆和同一品种非转基因大豆根系提取物培养基中菌落直径的差异显著性,确定转基因抗旱大豆对土壤功能微生物和病原微生物是否具有影响。将上述接种各功能菌的选择性培养基在28~30℃条件下继续培养至10天后,在28℃~30℃条件下干燥后研细,测定每个培养基中功能菌对应的酶活性,如脲酶、磷酸酶和纤维素酶活性。
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