• 专利标题: 一种高效提取纯化油菜脂肪酶的方法
  • 专利标题(英): High-efficient extraction and purification method of rape lipase
  • 申请号: CN200910235070.4
    申请日: 2009-11-13
  • 公开(公告)号: CN101701211B
    公开(公告)日: 2012-05-23
  • 发明人: 谭小力魏明玉袁伟伟王政张志燕
  • 申请人: 江苏大学
  • 申请人地址: 江苏省镇江市学府路301号
  • 专利权人: 江苏大学
  • 当前专利权人: 江苏大学
  • 当前专利权人地址: 江苏省镇江市学府路301号
  • 代理机构: 南京知识律师事务所
  • 代理商 汪旭东
  • 主分类号: C12N9/20
  • IPC分类号: C12N9/20
一种高效提取纯化油菜脂肪酶的方法
摘要:
本发明一种高效提取纯化油菜脂肪酶的方法,按照下述步骤进行:(1)确定油菜最佳提取脂肪酶时间:(2)将提取的粗酶液边搅拌边向其中加入固体硫酸铵,将蛋白质沉淀用蒸馏水溶解得到盐析液,该条件下脂肪酶的回收率为93.49%,纯化倍数达到1.06;(3)然后选用截留分子量为100000Da的超滤膜对脂肪酶盐析液进行浓缩;(4)采用离子交换柱层析纯化超滤液中脂肪酶,得到油菜脂肪酶蛋白,纯度分别为3.13u/mg和9.14u/mg,总回收率为43.94%。本发明提供的油菜脂肪酶纯化过程中,区别于微生物脂肪酶分离纯化工艺,采用液氮研磨破碎植物细胞壁,溶解植物细胞质内脂肪酶和植物细胞膜内脂肪酶,提供了一种提取纯化植物细胞内分泌脂肪酶的方法,纯度高,回收率高,酶纯化倍数为4.83。
公开/授权文献
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