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公开(公告)号：CN105063085A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510461606.X
申请日：2015-07-31
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明公开了一种控制甘蓝型油菜菌核病的基因BnMPK3及应用，属于植物基因工程领域；主要涉及一种控制甘蓝型油菜菌核病的基因BnMPK3的分离克隆、功能验证和应用，BnMPK3基因具有控制作物菌核病的功能，本发明通过实验验证在菌核病处理甘蓝型油菜时BnMPK3的表达量显著提高，通过基因工程技术提高BnMPK3基因的表达量能够控制作物菌核病，从而提高甘蓝型油菜及其他作物的抗病性和产量。
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公开(公告)号：CN101701211B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200910235070.4
申请日：2009-11-13
申请人： 江苏大学
IPC分类号： C12N9/20
摘要： 本发明一种高效提取纯化油菜脂肪酶的方法，按照下述步骤进行：(1)确定油菜最佳提取脂肪酶时间：(2)将提取的粗酶液边搅拌边向其中加入固体硫酸铵，将蛋白质沉淀用蒸馏水溶解得到盐析液，该条件下脂肪酶的回收率为93.49％，纯化倍数达到1.06；(3)然后选用截留分子量为100000Da的超滤膜对脂肪酶盐析液进行浓缩；(4)采用离子交换柱层析纯化超滤液中脂肪酶，得到油菜脂肪酶蛋白，纯度分别为3.13u/mg和9.14u/mg，总回收率为43.94％。本发明提供的油菜脂肪酶纯化过程中，区别于微生物脂肪酶分离纯化工艺，采用液氮研磨破碎植物细胞壁，溶解植物细胞质内脂肪酶和植物细胞膜内脂肪酶，提供了一种提取纯化植物细胞内分泌脂肪酶的方法，纯度高，回收率高，酶纯化倍数为4.83。
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公开(公告)号：CN106834340A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710025164.3
申请日：2017-01-13
申请人： 江苏大学
CPC分类号： C12N15/8261 , C12N15/8205 , C12Q1/6895 , C12Q2600/13
摘要： 本发明涉及一种获得高密度种植和机械化收获的油菜材料的方法，属于植物基因工程和生物技术领域；本发明首先采用农杆菌浸花法将激活标签载体pCB260转化到油菜中；对转化植株种子利用绿色荧光蛋白GFP筛选；并采用草丁膦除草剂筛剂筛选油菜转化株；最后采用PCR方法鉴定转化植株；对转化植株的表型分析发现，最终得到少分枝油菜突变体，记为sfz，该植株在F2代生长中符合孟德尔遗传定律，幼苗期叶片表面发亮，成熟期分枝较少，有效分枝高度增高，并且角果集中在植株顶端；本发明利用激活标签载体pCB260转化油菜后所获得油菜突变体，为机械化大规模生产研究提供了新材料，具有重要应用前景。
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公开(公告)号：CN104212833A
公开(公告)日：2014-12-17
申请号：CN201310209747.3
申请日：2013-05-30
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明涉及一种新型转基因载体及其构建、体内含有新型重组基因家蚕培育方法，这种新型转基因家蚕具有一种重组的含MMP酶切位点的丝素重链蛋白基因，这项发明属于农业昆虫优良品种培育利用领域；新型转基因载体构建流程图见附图；利用MMPs酶切位点可被MMPs酶切的特点，将MMPs酶切位点引入到家蚕丝素中，使家蚕丝素具有新的性能，达到通过生物学方法对家蚕丝素改性的目的；本专利将含有MMPs酶切位点的重组丝素蛋白基因克隆到PiggyBac转座子载体上并将该载体通过显微注射的方法注入家蚕蚕卵内，蚕卵经孵化后通过选择眼睛发绿色荧光的个体确定培育成功的新型转基因家蚕。
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公开(公告)号：CN101748137B
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN200910232919.2
申请日：2009-10-09
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明公开了一种提高酵母油脂含量的基因及应用，所说的基因是油菜长链脂酰CoA合成酶基因PXT143，它具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的蛋白质具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。本发明通过酵母互补实验证明PXT143编码蛋白具有长链脂酰CoA合成酶活性；在重要油料作物油菜中的时空表达谱以及在不同含油量油菜中的表达差异分析显示，在不同时期高含油量品种中PXT143表达水平显著高于低含油量品种；运用基因工程技术提高PXT143表达量显著提高酵母油脂含量。表明PXT143编码的蛋白具有明显提高酵母油脂含量的功能。
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公开(公告)号：CN101701211A
公开(公告)日：2010-05-05
申请号：CN200910235070.4
申请日：2009-11-13
申请人： 江苏大学
IPC分类号： C12N9/20
摘要： 本发明一种高效提取纯化油菜脂肪酶的方法，按照下述步骤进行：(1)确定油菜最佳提取脂肪酶时间；(2)将提取的粗酶液边搅拌边向其中加入固体硫酸铵，将蛋白质沉淀用蒸馏水溶解得到盐析液，该条件下脂肪酶的回收率为93.49％，纯化倍数达到1.06；(3)然后选用截留分子量为100000Da的超滤膜对脂肪酶盐析液进行浓缩；(4)采用离子交换柱层析纯化超滤液中脂肪酶，得到油菜脂肪酶蛋白，纯度分别为3.13u/mg和9.14u/mg，总回收率为43.94％。本发明提供的油菜脂肪酶纯化过程中，区别于微生物脂肪酶分离纯化工艺，采用液氮研磨破碎植物细胞壁，溶解植物细胞质内脂肪酶和植物细胞膜内脂肪酶，提供了一种提取纯化植物细胞内分泌脂肪酶的方法，纯度高，回收率高，酶纯化倍数为4.83。
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公开(公告)号：CN105255915B
公开(公告)日：2018-10-09
申请号：CN201510596226.7
申请日：2015-09-18
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明公开了一种控制甘蓝型油菜抗菌核病和促进油菜种子萌发的基因及其应用，具体涉及一种增强植物对核盘菌生物胁迫抗性和促进油菜种子萌发的AtGDSL基因，同时还对AtGDSL基因在增强植物对核盘菌抗性和促进油菜种子萌发中的功能进行了验证和应用验证；本发明通过基因工程技术手段，将外源拟南芥AtGDSL基因导入油菜植株，使其在甘蓝型油菜中过量表达外源拟南芥AtGDSL基因后，油菜植株的抗菌核病能力显著提高，而且种子萌发能力显著增强；本发明的AtGDSL基因对抗核盘菌有明显效果，可应用在植物抗逆育种，提高植物的抗逆性，而增强种子的萌发速度，则可为油菜大规模机械化生产提供优良育种材料。
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公开(公告)号：CN102643837A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201210075997.8
申请日：2012-03-21
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明属于基因工程和蛋白质表达领域，涉及一种利用烟草瞬时表达系统表达禽流感病毒血凝素（HA）基因。所述的Re-5疫苗株血凝素（HA）基因，序列如SEQIDNO.1所示。通过基因工程方法，该基因在烟草叶片中表达。发现HA主要在烟草的细胞间隙表达，三个含目的基因的构建都能表达Re-5疫苗株血凝素（HA）基因，Kozak-HA-6×His-pB2GW7.0(DelateBar)表达载体Re-5疫苗株血凝素（HA）基因的表达量最高。本发明还发现烟草注射Kozak-HA-6×His-pB2GW7.0(DelateBar)表达载体后，Re-5疫苗株血凝素（HA）基因在第六天表达量最高。
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公开(公告)号：CN101748137A
公开(公告)日：2010-06-23
申请号：CN200910232919.2
申请日：2009-10-09
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明公开了一种提高酵母油脂含量的基因及应用，所说的基因是油菜长链脂酰CoA合成酶基因PXT143，它具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的蛋白质具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。本发明通过酵母互补实验证明PXT143编码蛋白具有长链脂酰CoA合成酶活性；在重要油料作物油菜中的时空表达谱以及在不同含油量油菜中的表达差异分析显示，在不同时期高含油量品种中PXT143表达水平显著高于低含油量品种；运用基因工程技术提高PXT143表达量显著提高酵母油脂含量。表明PXT143编码的蛋白具有明显提高酵母油脂含量的功能。
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公开(公告)号：CN103911384B
公开(公告)日：2016-05-25
申请号：CN201410026575.0
申请日：2014-01-21
申请人： 江苏大学
IPC分类号： C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/84 , A01H5/00
摘要： 本发明公开了一种控制甘蓝型油菜菌核病基因及其应用，具体涉及一种控制甘蓝型油菜菌核病的基因BnWRKY33的分离克隆、功能验证和应用。BnWRKY33基因具有控制作物菌核病的功能，在菌核病处理甘蓝型油菜时BnWRKY33的表达量显著提高。通过基因工程技术提高BnWRKY33基因的表达量能够控制油菜菌核病，从而对提高甘蓝型油菜及其他作物的菌核病抗性和产量具有重要的应用前景。
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