本发明公开了一株单核细胞增生利斯特氏菌菌株及其用途。本发明单核细胞增生利斯特氏菌菌株(Listeria monocytogenes)的微生物保藏号是CGMCCNo.3342。本发明菌株同时对磷霉素、四环素、诺氟沙星及头孢噻肟四种抗生素耐受，为四重耐药菌株，可用于单一耐药机制和多重耐药机制的研究，同时也可用于耐药性消除试验的研究。本发明菌株是一株携带可转移的tetM基因的特殊菌株，可用于tetM耐药基因水平传播机制的研究，同时也为研究四环素耐药性扩散的防控手段提供物质基础。