本发明涉及一种手性β-羟基酯类化合物的酶催化合成方法，合成路线如式（1）所示。通过使化合物i与化合物ii在0℃～室温、吡啶做缚酸剂的条件下反应，所得产物经萃取浓缩后再在R2OH中回流，然后重结晶得化合物iii；再将化合物iii、酮还原酶以及辅酶一起加入pH=6～8的磷酸缓冲液中，15～40℃下反应2～24小时，得到本发明的手性β-羟基酯类化合物iv。本发明采用酶催化合成方法制得手性β-羟基酯类化合物，无需使用昂贵的手性试剂，具有生产工艺条件温和、原料易得、转化率高、生产成本低等诸多优点，宜于大规模工业化生产。