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公开(公告)号：CN103725727B
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201410003734.5
申请日：2014-01-06
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C12P17/06
摘要： 本发明涉及一种辛伐他汀铵盐的制备方法，底物莫纳可林J酸、2,2-二甲基丁酸-2-巯代乙氧基乙酸酯和氨水在重组酰基转移酶的作用下反应生成所述的辛伐他汀铵盐，所述的底物莫纳可林J酸与所述的2,2-二甲基丁酸-2-巯代乙氧基乙酸酯的质量比为1:0.6~1，所述的反应在pH为8.5~10的条件下进行。本发明方法采用2,2-二甲基丁酸-2-巯代乙氧基乙酸酯作为合成辛伐他汀侧链的酰基供体，该酰基供体具有投料量低、合成原料便宜、易于合成，使得本发明的生产成本显著降低，具有重要的使用价值。
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公开(公告)号：CN102605026B
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201210056231.5
申请日：2012-03-06
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C12P19/32
摘要： 本发明涉及一种氧化型辅酶I的制备方法，该方法使烟酰胺核苷(NR)和三磷酸腺苷二钠盐(ATP-Na2)在pH为5.0~8.0的缓冲溶液中，在烟酰胺核苷激酶(NRK)的催化作用下以及二价金属离子存在下，在温度30℃~40℃下反应得到氧化型辅酶I(NAD+)。本发明采用生物催化的方法，利用烟酰胺核苷激酶一锅法制备氧化型辅酶，反应体系简单，条件温和，具备良好的产业化应用前景。
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公开(公告)号：CN102634546A
公开(公告)日：2012-08-15
申请号：CN201210070084.7
申请日：2012-03-16
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C12P7/62
摘要： 本发明涉及一种手性β-羟基酯类化合物的酶催化合成方法，合成路线如式（1）所示。通过使化合物i与化合物ii在0℃~室温、吡啶做缚酸剂的条件下反应，所得产物经萃取浓缩后再在R2OH中回流，然后重结晶得化合物iii；再将化合物iii、酮还原酶以及辅酶一起加入pH=6~8的磷酸缓冲液中，15~40℃下反应2~24小时，得到本发明的手性β-羟基酯类化合物iv。本发明采用酶催化合成方法制得手性β-羟基酯类化合物，无需使用昂贵的手性试剂，具有生产工艺条件温和、原料易得、转化率高、生产成本低等诸多优点，宜于大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN102605011A
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201210069347.2
申请日：2012-03-16
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C12P7/62
摘要： 本发明涉及一种(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的生物制备方法，其以4-氯-3-羰基丁酸乙酯为底物，使该底物在生物催化剂和氢供体的存在下发生不对称还原反应生成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，特别是，所述生物催化剂为酮还原酶KRED102，所述氢供体为异丙醇，所述不对称还原反应在pH为5.0~9.0的水相缓冲液中进行，并且反应体系中添加有聚乙二醇400作为底物分散剂以及二价金属离子作为酶活力增强剂。本发明方法通过添加廉价且来源广泛的辅料，有效地改进了传统酶催化生产过程中底物浓度低、酶反应耗时长等缺点，且操作简单，特别适合在制药工业中推广应用。
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公开(公告)号：CN103772247B
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201410003821.0
申请日：2014-01-06
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C07C327/28 , C07C69/30 , C07C67/03
摘要： 本发明涉及一种可用于合成辛伐他汀铵盐的酰基供体的制备方法，在氮气保护下，2-巯基乙醇与2,2-二甲基丁酰氯先在-5~+5℃下反应2~6小时，然后在20~30℃下反应8~12小时，生成2,2-二甲基丁酸-2-巯代乙醇酯，然后2,2-二甲基丁酸-2-巯代乙醇酯与乙酰氯在0~10℃下反应2~3小时，然后在20~30℃下反应6~12小时，生成辛伐他汀铵盐侧链的酰基供体2,2-二甲基丁酸-2-巯代乙氧基乙酸酯。本发明中辛伐他汀铵盐侧链的酰基供体2,2-二甲基丁酸-2-巯代乙氧基乙酸酯的合成原料便宜易得，且合成工艺简单，易于放大；2-巯基乙醇沸点低，易于回收套用，减少污染，进一步降低了成本，产品竞争力强。
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公开(公告)号：CN103709058B
公开(公告)日：2015-09-02
申请号：CN201310664505.3
申请日：2013-12-10
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C07C229/22 , C07C227/08 , C12P7/62
摘要： 本发明涉及一种左旋肉碱的合成方法，在25~35℃下，将底物4-氯乙酰乙酸乙酯溶解在磷酸盐缓冲液中，然后在酮还原酶、辅酶和异丙醇的作用下，底物在pH为6~7的条件下反应20~50小时，生成(R)-4-氯-3-羟基-丁酸乙酯；将氢氧化钠溶解在质量比为25%的三甲胺水溶液中形成混合溶液，然后在-5~5℃下，将混合溶液缓慢滴加到 (R)-4-氯-3-羟基-丁酸乙酯中，于-5~5℃下反应20~30小时，停止反应，调节pH为5~7，然后经离心、超滤、树脂纯化得到左旋肉碱。本发明改进了生产流程，提高了底物浓度，降低了酶用量，使得生产成本降低，提高了产品的市场竞争力。
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公开(公告)号：CN103772248A
公开(公告)日：2014-05-07
申请号：CN201410003395.0
申请日：2014-01-06
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C07C327/32 , C07C69/30 , C07C67/03
摘要： 本发明涉及一种辛伐他汀侧链的酰基供体制备方法，包括如下步骤：步骤（1）：在氮气的保护下，无水乙醇、3-巯基丙酸在氢离子的存在下，在60℃~90℃下反应10~16小时，得到3-巯基丙酸乙酯；步骤（2）：3-巯基丙酸乙酯与2,2-二甲基丁酰氯在有机溶剂的存在下，反应生成辛伐他汀侧链的酰基供体2,2-二甲基丁酸-3-巯基丙酸乙酯。本发明中的2,2-二甲基丁酸-3-巯基丙酸乙酯的合成原料便宜易得，合成方法简单易行，该酰基供体稳定性好，在合成辛伐他汀时不易水解，且原料中的3-巯基丙酸乙酯可以回收利用，不但进一步降低了成本，而且避免水解产物3-巯基丙酸导致辛伐他汀原料药的降解问题，使得辛伐他汀产品质量更稳定。
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公开(公告)号：CN103361386A
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201310267953.X
申请日：2013-06-28
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
CPC分类号： C12P7/62
摘要： 本发明涉及罗素伐他汀中间体(R)-3-羟基戊二酸单甲酯和羟基被保护的(R)-3-羟基戊二酸单甲酯的制备方法，该方法以(R)-4-氰基-3-羟基丁酸甲酯为底物，使其在酶的作用下反应生成所述(R)-3-羟基戊二酸单甲酯，特别是，所述的酶为重组腈水解酶，所述的反应在pH为7.0~9.0的水相缓冲液中以及温度25℃~35℃下进行。本发明方法通过采用特定的重组腈水解酶，解决了现有生物法中底物浓度过低，转化率低的问题。该方法反应条件温和，反应效率高，操作简便，具有重要的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN102634546B
公开(公告)日：2013-10-16
申请号：CN201210070084.7
申请日：2012-03-16
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C12P7/62
摘要： 本发明涉及一种手性β-羟基酯类化合物的酶催化合成方法，合成路线如式（1）所示。通过使化合物i与化合物ii在0℃～室温、吡啶做缚酸剂的条件下反应，所得产物经萃取浓缩后再在R2OH中回流，然后重结晶得化合物iii；再将化合物iii、酮还原酶以及辅酶一起加入pH=6～8的磷酸缓冲液中，15～40℃下反应2～24小时，得到本发明的手性β-羟基酯类化合物iv。本发明采用酶催化合成方法制得手性β-羟基酯类化合物，无需使用昂贵的手性试剂，具有生产工艺条件温和、原料易得、转化率高、生产成本低等诸多优点，宜于大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN102634502B
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN201210072332.1
申请日：2012-03-19
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
摘要： 本发明涉及一种卤醇脱卤酶的生产方法，是利用微生物发酵生产卤醇脱卤酶，通过优化发酵工艺和发酵培养基，提高卤醇脱卤酶的产量和活性。本发明利用的基因工程菌为表达了卤醇脱卤酶的重组大肠杆菌，发酵培养基的组成包括：酵母粉9~15g/L、甘油4.5~7.5g/L、NaCl8~11g/L、NaNO31~2g/L，KH2PO42~3g/L，K2HPO412~13g/L，微量元素2~5mg/L；所述微量元素包括CoCl2·6H2O、MnCl2·4H2O、CuCl2·4H2O和生物素等。本发明能够显著地提高卤醇脱卤酶的产量，酶活性可提高至900U/ml。
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