一种高效降解木质纤维素的菌株保藏培养液及其制备方法，属于生物技术领域。其特征在于每1L去离子水中含有下述物质：硫酸镁、硫酸铁、硝酸铵、谷氨酰胺、钼酸钠、氯化钴、碘化钾、磷酸二氢钾、酵母粉、葡萄糖、硫化甘醇酸钠、柠檬酸、淀粉、牛肉膏、天冬酰胺、桃胶。上述一种高效降解木质纤维素的菌株保藏培养液，培养液中添加了多种能够促进降解木质纤维素的菌株迅速、稳定生长的营养元素；其培养液制作方法简便，设备投资少，原料成本低廉，且能准确稳定高效的培养出适应性强的优良菌株，所得菌株降解木质纤维素的活性高于自然界中自然生长的菌株。