本发明公开了一种高效液相色谱法测定组合物中巯基化合物含量的方法，公开了甲酸在使用高效液相色谱分析法测定组合物中巯基化合物的含量时作为稳定剂的应用，流动相为含有甲酸的水相与有机相的混合物。本发明与仅仅包含有磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、离子对试液或单独的纯水作流动相相比较而言，可以明显解决或减缓巯基化合物在供试液和流动相中因极端不稳定现象而造成的含量测定误差，对有些巯基化合物还可避免磷酸盐缓冲液的色谱图峰形造成分叉的影响，起到优化色谱图峰形的好处。可以很好的保证巯基化合物的含量测定的稳定性和可重复性。