本发明涉及一种金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条，以及该免疫胶体金试纸条的制备方法，属于免疫检测技术领域。该试纸条由样品垫、涂覆金标标记抗SEE抗体1E5（CGMCC No.7214）的金标垫，在检测线、质控线分别包被有抗SEE抗体2E3（CGMCC No.7215）及羊抗鼠IgG的硝酸纤维素膜构成，依次按样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫粘附在PVC底板上。该试纸条操作简便、快速、准确，测试全过程只需5分钟，不受环境条件的干扰，特异性好，检测灵敏度高，最低检测限为0.25ng/mL。本发明适用于海关、企业、医院、检验检疫单位等，可实现食品或临床样本中金黄色葡萄球菌肠毒素E的快速检测。