公开(公告)号：CN104360069A

公开(公告)日：2015-02-18

申请号：CN201410688936.8

申请日：2014-11-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐丽广 ,  孔德昭 ,  胥传来 ,  匡华 ,  马伟 ,  刘丽强 ,  宋珊珊 ,  吴晓玲 ,  冯民

IPC: G01N33/577

CPC classification number: G01N33/577 ,  G01N2333/21

Abstract: 一种检测丁香假单胞菌丁香致病变种的双抗体夹心酶联免疫法，属于免疫分析领域。本发明用丁香假单胞菌丁香致病变种NCPPB2844（来自湖南省进出口检验检疫局）免疫8周龄BALB/c小鼠，经免疫、细胞融合、筛选得7株单抗。7株单抗分别标记HRP并以NCPPB2844作标准品两两配对。以13B10抗体为包被抗体（CGMCCNo.9801单克隆细胞株L），13B10抗体标记HRP后为酶标抗体（13B10-HRP），以NCPPB2844为标准品建立了丁香致病变种的夹心ELISA法。LOD：2.4×104cfu/mL，线性范围4.57×104~1.11×108cfu/mL。本发明用理化性质高度均一、特异性好、可大量制备的单抗建立的夹心法灵敏度高，成本低，特异性好，为丁香致病变种的检测提供快速高效的分析手段。

公开(公告)号：CN103760351A

公开(公告)日：2014-04-30

申请号：CN201410019623.3

申请日：2014-01-16

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐丽广 ,  胥传来 ,  孔德昭 ,  匡华 ,  马伟 ,  宋珊珊 ,  刘丽强

IPC: G01N33/577 ,  G01N21/78

CPC classification number: G01N33/56938 ,  G01N2333/31

Abstract: 一种检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素D的双抗体夹心法，属于免疫分析技术领域。本发明应用购于北京军事医学科学院的重组金黄色葡萄球菌肠毒素D（SED）免疫8周龄BALB/c小鼠，经正常的免疫、细胞融合、筛选后得到10株SED单克隆抗体。10株抗体分别标记辣根过氧化物酶并进行两两配对。最后选定以5F2（CGMCC？No.7212）、10F1（CGMCC？No.7213）分别为包被抗体和酶标抗体，以SED为标准品建立了SED的双抗体夹心法。LOD为0.006ng/mL，线性范围0.02-2.5ng/mL。本发明采用理化性质高度均一、特异性好、可大量制备的单克隆抗体，建立的夹心法灵敏度高，成本低，与金黄色葡萄球菌肠毒素A、B、C、E无交叉反应，为食品中SED的检测提供了快速高效的分析手段。

公开(公告)号：CN104031142B

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201410254563.3

申请日：2014-06-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 马伟 ,  胥传来 ,  孔德昭 ,  匡华 ,  徐丽广 ,  刘丽强 ,  宋珊珊 ,  吴晓玲

IPC: C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53

Abstract: 一种高特异性的叶酸完全抗原合成方法及其应用，属于生物化工技术领域。本发明是在载体蛋白溶液中加入6?氨基己酸与水溶性碳二亚胺后室温下反应，透析后得到修饰了连接臂的载体蛋白B。叶酸（N?{4?[(2?氨基?1,4?二氢?4?氧代?6?喋啶)甲氨基]苯甲酰基}?L?谷氨酸）溶解于二甲亚砜，加入二环己基碳二亚胺与羟基琥珀酰亚胺，反应生成叶酸衍生物，再与载体蛋白B连接臂上的氨基进行偶联，得到完全抗原。结果表明，用本发明的抗原免疫动物得到的抗血清效价达81000，检测限0.042ng/mL，半抑制浓度0.3ng/mL。产生的抗体特异性高、灵敏度高。本发明的抗原或抗体用于免疫亲和柱的制备及建立酶联免疫吸附分析方法和胶体金试纸快速检测法，用于检测叶酸残留。

公开(公告)号：CN104316688B

公开(公告)日：2016-06-22

申请号：CN201410546445.X

申请日：2014-10-16

Applicant: 江南大学

Inventor： 匡华 ,  孔德昭 ,  胥传来 ,  徐丽广 ,  马伟 ,  刘丽强 ,  宋珊珊 ,  吴晓玲

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/531

Abstract: 一种检测水稻细菌性条斑病菌的双抗体夹心酶联免疫法，属于免疫分析技术领域。本发明用水稻细菌性条斑病菌免疫小鼠，得7株水稻细菌性条斑病菌单抗。分别标记辣根过氧化物酶并以水稻细菌性条斑病菌菌体两两配对。以3D7（单克隆细胞株J号）作为包被抗体，4H6（单克隆细胞株K号）作为酶标抗体，以水稻细菌性条斑病菌菌体为标准品建立水稻细菌性条斑病菌的夹心ELISA法。本发明采用理化性质高度均一、特异性好、可大量制备的单抗，建立的夹心法灵敏度高，成本低，与丁香假单胞杆菌斑点致病变种，水稻白叶枯病菌，水稻细菌性谷枯病菌，玉米细菌性枯萎病菌，丁香假单胞菌丁香致病变种无交叉反应，为水稻种子中细菌性条斑病菌的检测提供了快速高效的分析手段。

公开(公告)号：CN103760351B

公开(公告)日：2015-05-20

申请号：CN201410019623.3

申请日：2014-01-16

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐丽广 ,  胥传来 ,  孔德昭 ,  匡华 ,  马伟 ,  宋珊珊 ,  刘丽强

IPC: G01N33/577 ,  G01N21/78

Abstract: 一种检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素D的双抗体夹心法，属于免疫分析技术领域。本发明应用购于北京军事医学科学院的重组金黄色葡萄球菌肠毒素D（SED）免疫8周龄BALB/c小鼠，经正常的免疫、细胞融合、筛选后得到10株SED单克隆抗体。10株抗体分别标记辣根过氧化物酶并进行两两配对。最后选定以5F2（CGMCC No.7212）、10F1（CGMCC No.7213）分别为包被抗体和酶标抗体，以SED为标准品建立了SED的双抗体夹心法。LOD为0.006ng/mL，线性范围0.02-2.5ng/mL。本发明采用理化性质高度均一、特异性好、可大量制备的单克隆抗体，建立的夹心法灵敏度高，成本低，与金黄色葡萄球菌肠毒素A、B、C、E无交叉反应，为食品中SED的检测提供了快速高效的分析手段。

公开(公告)号：CN103713104B

公开(公告)日：2015-02-11

申请号：CN201310727858.3

申请日：2013-12-26

Applicant: 中华人民共和国淮安出入境检验检疫局 ,  江南大学

Inventor： 冯民 ,  王小晋 ,  匡华 ,  孔德昭 ,  胥传来 ,  徐丽广 ,  马伟 ,  刘丽强

IPC: G01N33/02 ,  G01N33/577

Abstract: 一种检测食品中阪崎肠杆菌的双抗体夹心法，属于免疫分析领域。本发明应用阪崎肠杆菌(ATCC29544)，及阪崎肠杆菌ATCC29544耦联BSA提取的LPS分别为免疫原同时免疫BALB/c小鼠，经免疫、融合、筛选得11株阪崎肠杆菌单抗，分别标记HRP并以阪崎肠杆菌进行两两配对。以7号单抗CGMCCNo.7207为包被抗体，8号单抗CGMCCNo.7208为酶标抗体，以ATCC29544为标准品建立了阪崎肠杆菌的夹心ELISA法，LOD为53000CFU/mL。本发明采用理化性质高那均一、特异性好、可大量制备的单抗，建立的夹心法灵敏度高，成本低，与肠炎沙门氏菌、E.coli、E.coliO157:H7、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌无交叉反应，为食品中阪崎肠杆菌的检测提供了快速高效的分析手段。

公开(公告)号：CN103995031A

公开(公告)日：2014-08-20

申请号：CN201410255539.1

申请日：2014-06-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 马伟 ,  胥传来 ,  孔德昭 ,  匡华 ,  徐丽广 ,  刘丽强 ,  宋珊珊 ,  吴晓玲

IPC: G01N27/26 ,  G01N27/30

Abstract: 一种植物病毒纸质检测传感器的制备方法及检测方法，属于病毒检测技术领域。本发明利用纳米功能材料羧基修饰短臂碳纳米管，通过Dip-Dry技术对实验滤纸进行包裹，并在包裹过程中在包裹液中加入西瓜花叶病毒二号（WMV-2）的高特异性抗体，从而制备出能够特异性检测西瓜花叶病毒二号的纸质检测传感器。检测灵敏度为0.1nmol/L，与传统的检测方法相比具有相当的检测灵敏度，整个过程不超过30min，检测时间大大缩短，显著的提高了检测效率。在检测过程中，只需要更换纸质检测传感器包裹液中抗体种类，即可以得到对应植物病毒的纸质检测传感器。

公开(公告)号：CN103777004A

公开(公告)日：2014-05-07

申请号：CN201410051704.1

申请日：2014-02-14

Applicant: 江南大学

Inventor： 匡华 ,  胥传来 ,  孔德昭 ,  马伟 ,  徐丽广 ,  宋珊珊 ,  刘丽强

IPC: G01N33/558 ,  G01N33/531

CPC classification number: G01N33/56938 ,  G01N33/54386 ,  G01N33/558 ,  G01N2333/31

Abstract: 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条，以及该免疫胶体金试纸条的制备方法，属于免疫检测技术领域。该试纸条由样品垫、涂覆金标标记抗SEE抗体1E5（CGMCC？No.7214）的金标垫，在检测线、质控线分别包被有抗SEE抗体2E3（CGMCC？No.7215）及羊抗鼠IgG的硝酸纤维素膜构成，依次按样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫粘附在PVC底板上。该试纸条操作简便、快速、准确，测试全过程只需5分钟，不受环境条件的干扰，特异性好，检测灵敏度高，最低检测限为0.25ng/mL。本发明适用于海关、企业、医院、检验检疫单位等，可实现食品或临床样本中金黄色葡萄球菌肠毒素E的快速检测。

公开(公告)号：CN103713104A

公开(公告)日：2014-04-09

申请号：CN201310727858.3

申请日：2013-12-26

Applicant: 中华人民共和国淮安出入境检验检疫局 ,  江南大学

Inventor： 冯民 ,  王小晋 ,  匡华 ,  孔德昭 ,  胥传来 ,  徐丽广 ,  马伟 ,  刘丽强

IPC: G01N33/02 ,  G01N33/577

Abstract: 一种检测食品中阪崎肠杆菌的双抗体夹心法，属于免疫分析领域。本发明应用阪崎肠杆菌(ATCC29544)，及阪崎肠杆菌ATCC29544耦联BSA提取的LPS分别为免疫原同时免疫BALB/c小鼠，经免疫、融合、筛选得11株阪崎肠杆菌单抗，分别标记HRP并以阪崎肠杆菌进行两两配对。以7号单抗CGMCCNo.7207为包被抗体，8号单抗CGMCCNo.7208为酶标抗体，以ATCC29544为标准品建立了阪崎肠杆菌的夹心ELISA法，LOD为53000CFU/mL。本发明采用理化性质高那均一、特异性好、可大量制备的单抗，建立的夹心法灵敏度高，成本低，与肠炎沙门氏菌、E.coli、E.coliO157:H7、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌无交叉反应，为食品中阪崎肠杆菌的检测提供了快速高效的分析手段。

公开(公告)号：CN104360069B

公开(公告)日：2016-04-13

申请号：CN201410688936.8

申请日：2014-11-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐丽广 ,  孔德昭 ,  胥传来 ,  匡华 ,  马伟 ,  刘丽强 ,  宋珊珊 ,  吴晓玲 ,  冯民

IPC: G01N33/577

Abstract: 本发明属于免疫分析领域。本发明用丁香假单胞菌丁香致病变种NCPPB 2844免疫8周龄BALB/c小鼠，经免疫、细胞融合、筛选得7株单抗。7株单抗分别标记HRP并以NCPPB 2844作标准品两两配对。以13B10抗体为包被抗体，13B10抗体标记HRP后为酶标抗体，以NCPPB 2844为标准品建立了丁香致病变种的夹心ELISA法。LOD：2.4×104 cfu/mL，线性范围4.57×104~1.11×108cfu/mL。本发明用理化性质高度均一、特异性好、可大量制备的单抗建立的夹心法灵敏度高，成本低，特异性好，为丁香致病变种的检测提供快速高效的分析手段。