本发明公开了一株狐粪青霉真菌菌株以及利用该菌株制备左旋7‑羟基丁苯酞（(S)‑(‑)‑3‑butyl‑7‑hydroxyphthalide）的方法。本发明提供的菌株为一株狐粪青霉真菌菌株NCC3421（Penicillium vulpinum），保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心（简称CGMCC），保藏编号为CGMCC No.9094。在本发明提供的培养条件下，左旋7‑羟基丁苯酞的发酵单位达到了1600mg/L以上，且发酵产物组分较为单一，易于分离纯化，可以用于左旋7‑羟基丁苯酞的工业化生产。