发明公开
- 专利标题: 一种玉米穗腐病病原物的双重PCR检测方法
- 专利标题(英): Duplex-PCR detection method for maize kernel rot pathogen
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申请号: CN201610093209.6申请日: 2016-02-19
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公开(公告)号: CN105543392A公开(公告)日: 2016-05-04
- 发明人: 施艳 , 李洪连 , 王振跃 , 袁虹霞 , 陈琳琳 , 孙炳剑 , 邢小萍
- 申请人: 河南农业大学
- 申请人地址: 河南省郑州市金水区文化路95号
- 专利权人: 河南农业大学
- 当前专利权人: 河南农业大学
- 当前专利权人地址: 河南省郑州市金水区文化路95号
- 代理机构: 郑州优盾知识产权代理有限公司
- 代理商 张绍琳; 张真真
- 主分类号: C12Q1/68
- IPC分类号: C12Q1/68
摘要:
本发明属于生物分子技术领域,涉及一种快速灵敏检测技术,具体涉及一种玉米穗腐病病原物的双重PCR检测方法。具体步骤为:(1)真菌菌丝的收集;(2)真菌DNA的提取;(3)PCR扩增:PCR反应总体系为,禾谷镰刀菌引物FvCal58-F/FvCal240-R和拟轮枝镰刀菌引物Fg16N-F/Fg16N-R各1μL,2×r-taq Master mix 5μL,模板DNA 1μL,灭菌双蒸馏水补足到10μL;双重PCR反应程序为94℃预变性5min;94℃变性30s,54℃退火30s,72℃延伸20s,共35个循环;72℃延伸10min。本发明利用双重PCR建立的同时检测方法,经济实惠,大幅节约实验室时间和检测成本,可在实际生产中应用检测,为田间引起玉米穗腐病的病原的快速检测奠定了基础,有利于提前对玉米穗腐病进行防治。