本发明公开了一种环戊烯酮类化合物及其制备方法和用途，特点是该环戊烯酮类化合物的结构式如Ⅰ所示，其制备方法步骤包括通过保藏号为CCTCC No.M2014086的焦曲霉发酵培养获取含有新环戊烯酮类化合物的发酵液，然后将发酵液用乙酸乙酯提取，得粗浸膏，将该提取物经减压硅胶柱层析、反相中压柱层析，最后反相半制备高效液相色谱分离纯化得到，该环戊烯酮类化合物具有抑制细胞活性，抗肿瘤作用，优点是化合物I与各种药物可接受的载体、赋形剂或辅料配伍，可制成抗肿瘤药物，用于肿瘤的治疗，化合物I还可作为抑制细胞增殖的低分子生物探针用于生命科学研究。