一种对激酶的正反应底物、其磷酸化物以及用于衍生为前述物质的衍生前体物中的至少一种进行测定的测定方法，该方法包括下述工序：使至少激酶、激酶的第一核苷酸辅酶以及与第一核苷酸辅酶的核苷部分不同的第二核苷酸辅酶与试样接触，使酶循环反应进行反应的工序；对于与第一核苷酸辅酶及其转化物以及第二核苷酸辅酶及其转化物中的至少任一种的变化量相对应的信号进行检测的工序；以及基于检测出的信号的变化量计算出试样所含有的激酶的正反应底物和/或其磷酸化物的量的工序。