本发明涉及一种长效阿莫西林硫酸黏菌素注射液及其制备方法，注射液包括以下组分及重量份含量：阿莫西林8‑12份、硫酸黏菌素0.2‑0.9份、助悬剂1‑3份、润湿剂0.5‑1.5份、抗氧化剂0.3‑0.8份、氧化锌0.2‑0.5份、克拉维酸0.8‑1.5份、pH稳定剂1.2‑2.5份以及分散媒80‑150份；制备时，先将助悬剂、润湿剂、抗氧化剂、氧化锌、克拉维酸及pH稳定剂加入至分散媒中，之后再加入阿莫西林及硫酸黏菌素，研磨即可。与现有技术相比，本发明不仅能够在减少组分用量的同时增加药效，同时还能延长药效代谢时间，一次注射便能够达到同品种常规剂型多次间隔注射的同样效果，减少了用药次数，降低了用药成本及人工成本，避免了应激反应的发生，且提高了有效杀菌组分的混悬附着效果，分散性好。