本发明公开了一种无滋养细胞的NK细胞的扩增方法：采用共混培养液培养NK细胞，培养7天；然后，改用自体血浆培养基培养，培养过程中每2～3天进行一次补液，维持细胞密度在2.0×106/mL，培养20天以上；所述共混培养液的组成如下：在淋巴细胞培养基的基础上，添加1～10％自体血浆，200～1500IU/mL的IL‑2，10～50ng/mL的IL‑15和10～50ng/mL的IL‑21；所述自体血浆培养基的组成如下：在无血清培养基的基础上，添加1～10％自体血浆，200IU/mL的IL‑2。本发明的无滋养细胞的NK细胞的扩增方法，以脐血或自体外周血为细胞来源，培养过程中无需滋养细胞，扩增效率高，所得NK细胞的纯度高。通过该方法获得的NK细胞，可作为细胞免疫疗法的医药组合物，主要用于治疗和/或预防传染病和/或癌症。