本发明涉及用于生产糖蛋白的动物细胞株及方法、糖蛋白及其用途，本发明的用于生产以高甘露糖型糖链为主要N‑糖链结构的糖蛋白的动物细胞株的特征在于，所述细胞株的高尔基体甘露糖苷酶基因和内质网甘露糖苷酶基因中的至少两种基因被破坏或敲除。根据本发明，可以获得具有复合型糖链含量大大降低、以Man9‑GlcNAc2和Man8‑GlcNAc2等高甘露糖型N‑糖链为主要结构的糖蛋白。本发明生产的以高甘露糖型糖链为主要N‑糖链结构的糖蛋白可用于生产包含溶酶体酶，抗体等生物药物分子，从而能够用于治疗各种溶酶体贮积症。