本发明公开了一种枯草芽孢杆菌Pro1A2、其菌剂和制备方法及在甜瓜栽培中的应用，旨在解决甜瓜栽培中病害防治效果不佳和连作障碍难以克服的技术问题。本发明首次筛选出一株枯草芽孢杆菌Pro1A2，并保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2017194。枯草芽孢杆菌Pro1A2制备的微生物菌剂既能够对植物真菌病害如甜瓜蔓枯病、甜瓜枯萎病、小麦全蚀病、稻瘟病等有较好的防治效果，又在防治细菌病害方面效果良好，如对甜瓜细菌性果斑病菌、桃细菌性穿孔病菌、烟草青枯病菌、白菜软腐病菌和番茄溃疡病菌等有较强的抑制作用；还能够克服甜瓜早衰重茬连作障碍；防治高效、使用简单、无造成环境污染。