本发明公开了一种富含产己酸菌营养液及其制备方法和应用，通过先活化后富集的两段式发酵，实现了在短时间内制备富含己酸菌和高产己酸的多菌种复合菌液，为改善白酒品质提供了一种新策略。将上述富含产己酸菌液用于人工窖泥老熟，可以减少老窖泥的使用量或代替老窖泥，实现新窖泥中产己酸菌在短期内大量富集，同时丰富其它有益菌(如梭菌)的组成，说明该方法能够保持窖泥群落中功能菌群的物种和代谢途径的多样性，增加这一人工富集群落在实际应用中的群落结构的稳定性。将上述富含产己酸菌液用于白酒酿造，可以提高白酒中酸类和酯类物质含量，尤其是己酸和己酸乙酯，显著改善白酒的风味品质，特别是有助于提高新窖池的优级酒产率。