本发明公开了一种4‑氯苯氧乙酸半抗原、人工抗原及其在免疫检测中的应用。本发明设计的4‑氯苯氧乙酸半抗原引入的手臂不仅具有活性基团，还可以完整保留待测目标物的羧基基团，使得半抗原与待测目标物的电子云密度保持一致，偶联简单。基于此构建的4‑氯苯氧乙酸人工抗原及单克隆抗体用于ELISA检测特异性强，IC50值为10.9μg/L；用于胶体金免疫层析技术时，灵敏度为20μg/L，实际样本中的检测限为70μg/kg，假阴和假阳性率均为0，且具有良好的特异性和稳定性。