本发明提供一种水溶性罗丹明基荧光/比色双模式探针及其制备方法与应用。本发明探针的制备方法包括步骤：罗丹明6G和水合联氨经反应制备得到罗丹明6G酰肼；聚乙二醇与4‑醛基苯甲酸经反应制备得到苯甲醛端基化的聚乙二醇；罗丹明6G酰肼与苯甲醛端基化的聚乙二醇经反应制备得到水溶性罗丹明基荧光/比色双模式探针。本发明所得双模式探针具有良好的水溶性和生物相容性、安全性，可用于生物荧光成像或疾病诊断领域；用于检测三价铁离子，样品制备简单，能通过荧光发射和肉眼观察，并显示出高的选择性、灵敏度和抗干扰能力，且pH适用范围广泛。