一种GLP-1类似物的半重组制备方法
摘要:
本发明公开了一种GLP‑1类似物的半重组制备方法。本发明通过将具有融合基因和顺式助溶蛋白因子DsbA的大肠杆菌重组工程菌株进行发酵,经诱导表达得到融合蛋白,提取并纯化融合蛋白,在特定的体外条件下定点化学修饰获得经脂肪酸侧链修饰的融合蛋白分子,最后经特异性酶切获得利拉鲁肽和索马鲁肽分子。所述的融合基因具有以下结构通式:f‑l‑a;其中,f为伴侣蛋白的编码基因,l为连接肽的编码基因,a为GLP‑1类似物的编码基因。本发明结合了重组表达和化学合成的技术优势,具有发酵产量高、可溶性表达蛋白比例高、修饰正确率高、纯化制备简单等特点,适用于工业化放大生产利拉鲁肽和索马鲁肽。
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