一种GLP-1类似物的半重组制备方法

    公开(公告)号:CN112522294A

    公开(公告)日:2021-03-19

    申请号:CN202011545059.0

    申请日:2020-12-24

    摘要: 本发明公开了一种GLP‑1类似物的半重组制备方法。本发明通过将具有融合基因和顺式助溶蛋白因子DsbA的大肠杆菌重组工程菌株进行发酵,经诱导表达得到融合蛋白,提取并纯化融合蛋白,在特定的体外条件下定点化学修饰获得经脂肪酸侧链修饰的融合蛋白分子,最后经特异性酶切获得利拉鲁肽和索马鲁肽分子。所述的融合基因具有以下结构通式:f‑l‑a;其中,f为伴侣蛋白的编码基因,l为连接肽的编码基因,a为GLP‑1类似物的编码基因。本发明结合了重组表达和化学合成的技术优势,具有发酵产量高、可溶性表达蛋白比例高、修饰正确率高、纯化制备简单等特点,适用于工业化放大生产利拉鲁肽和索马鲁肽。

    一种胰岛素DesB30的制备方法

    公开(公告)号:CN109735589B

    公开(公告)日:2020-07-10

    申请号:CN201910002001.2

    申请日:2019-01-02

    IPC分类号: C12P21/06 C07K14/62 C07K1/30

    摘要: 本发明公开了一种胰岛素DesB30的制备方法,包括以下步骤:S1、向胰岛素前体蛋白的发酵液中添加蛋白酶;S2、调节所述步骤S1处理后的溶液的pH值和温度使蛋白酶进行酶切,酶切后得到含有胰岛素DesB30的溶液。所述制备方法还可以包括步骤S3、对酶切后的含有胰岛素前体的溶液进行等电点沉淀回收操作,得到纯度更高的胰岛素DesB30。与现有技术相比,通过本发明方案制备胰岛素前体操作简便、设备投入低且工艺过程收率高,具有良好的工业应用前景。

    一种去B链30位氨基酸残基的胰岛素前体沉淀的回收方法

    公开(公告)号:CN108164594B

    公开(公告)日:2020-03-31

    申请号:CN201711292752.X

    申请日:2017-12-08

    IPC分类号: C07K14/62 C12P21/06 C07K1/30

    摘要: 本发明提供了一种去B链30位氨基酸残基的胰岛素前体沉淀的回收方法,包括:对胰岛素前体使用胰蛋白酶进行酶切;将二价金属离子加入到酶切后的反应体系中;调节反应体系的pH值至反应产物的等电点附近;收集获得的沉淀,酶切条件为30℃,1~2h,二价金属离子为具有水溶性的二价金属离子,包括Ni2+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、Fe2+和Mn2+,二价金属离子与胰岛素前体的摩尔比为0.5:1~4:1,pH为4.0~6.0,沉淀温度为0~30℃,沉淀时间为0~12h。使用本发明所提供的方法,不需要对酶切的反应体系进行处理,直接进行等电点沉淀,简化了生产工艺。相比目前已有的报道,上清液中产物残留率可以降低10倍以上,优势明显。

    一种稳定的油溶多肽组合物及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110339081A

    公开(公告)日:2019-10-18

    申请号:CN201910584254.5

    申请日:2019-07-01

    摘要: 本发明属于化妆品领域,公开了一种稳定的油溶多肽组合物,包括以下组分:多肽,增溶剂,油性溶剂;所述增溶剂的辛醇水分配系数为1.70-1.90或HLB值为8.0-10.0;所述多肽选自棕榈酰二肽-7、棕榈酰三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰三肽-8、棕榈酰四肽-5、棕榈酰四肽-7、棕榈酰四肽-10和棕榈酰五肽-4中的至少一种;所述增溶剂选自乙基己基甘油、甘油辛酸酯、脂肪酸聚氧乙烯酯、失水山梨醇月桂酸酯和聚氧乙烯氧丙烯油酸酯中的至少一种。本发明所述油溶多肽组合物易于添加至全油配方的化妆品中,且相容性良好,油溶多肽组合物的稳定性良好,不易长菌,与传统水溶性多肽产品相比不需加入防腐剂,配方更加安全。