本发明涉及鱼类分子设计育种技术，尤其涉及一种龙睛百褶裙泰狮金鱼的创制方法。该方法包括靶点设计、显微注射、受精孵化步骤。本发明基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术，对低密度脂蛋白2基因lrp2a进行敲除后在F0代金鱼上即产生了龙睛表型，通过实验确立了百褶裙泰狮金鱼高效的雌核生殖条件和高温扩群条件，在F1代即获得龙睛百褶裙泰狮金鱼纯合子；并通过温度诱导性逆转，F2代大量扩群。本发明通过分子育种手段，快速实现了单一目的性状的转移，稳定快速地创制了龙睛百褶裙泰狮金鱼这一具有高观赏价值的品种，具有广阔的应用前景和市场价值。