本发明公开了一种利用甘蔗糖蜜酶法制备海鲜调味基料的方法，包括以下步骤：(1)超微粉碎；(2)溶解、灭菌；(3)发酵；(4)生物酶解及去苦；(5)过滤除杂；(6)脱腥；(7)复配；(8)美拉德反应；(9)真空浓缩；(10)干燥。本发明以预处理的甘蔗糖蜜作为生产生物酶的碳源，可大大减少豆饼粉等粮食原材料的用量，使生物酶解的成本有效降低；本发明的海鲜调味基料完全由发酵技术、生物酶解去苦、脱腥技术和美拉德反应提鲜技术耦合完成，产品中呈味肽和呈味氨基酸含量较高，鲜味明显，无苦味、腥味，营养丰富，可广泛应用在食品添加剂中，保质期长、绿色安全，具有很好的市场前景。