本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种维生素K2系列产物的生物合成方法，包括如下步骤：步骤一、敲除Bacillus subtilis168基因中的hepS基因，得到△hepS菌株BS01；步骤二、敲除Bacillus subtilis168基因中的hepT基因，得到△hepT菌株BS02；步骤三、PCR扩增大肠杆菌yqiD基因或Bacillus subtilis168的hepT基因；将所得PCR产物连接表达载体pHY‑P43得到重组质粒，之后转到BS02，即得产生维生素K2系列产物的工程菌。该发明对于获取不同食品级维生素K2同系物具有十分重要的意义。