本发明提供了一种可更新电化学传感器及其构建方法和应用，属于属于生物传感器技术领域；在本发明中，以纳米多孔金为信号转换元件，以可更新段核酸短链(L‑DNA)修饰的粘附蛋白为中间连接元件，以可更新互补段核酸短链(C‑DNA)修饰的大肠杆菌适配体为生物识别元件，构建得到所述可更新电化学传感器，所述可更新电化学传感器可以在不重新制备电极的情况下通过更换不同种类生物识别元件实现不同检测对象的检测，具有良好的通用性；所述电化学传感器可重复使用多次，为同时检测不同浓度致病菌节约大量时间。