本发明涉及生物农药合成技术领域，特别涉及一种酶法合成高粱素的方法。一种酶法合成高粱素的方法，包括如下步骤：a、强心酚三烯在甲基转移酶与甜菜碱的作用下，生成甲基强心酚三烯；b、甲基强心酚三烯在细胞色素P450酶作用下，生成二氢高粱素；c、二氢高粱素自身氧化为高粱素。本发明针对高粱素植物提取方法局限，开发了其酶法制备工艺。相对于传统路线，改工艺具有路线短、反应条件温和、环保等优点，这不仅显著的降低了高粱素生产成本，同时也提高了其工业生产中安全及绿色指数。