本发明属于医药生物技术领域，具体公开了用于贲门腺癌诊断的生物标志物及检测试剂盒。本发明提供的用于贲门腺癌诊断的生物标志物为TP53自身抗体、BLOC1S4自身抗体、MAGEA1自身抗体、CTAG1A自身抗体、IGHM自身抗体中的至少一种，该标志物在贲门腺癌患者血清中的表达水平高于正常人，差异具有统计学意义。本发明还提供了一种用于贲门腺癌诊断的试剂盒，该试剂盒含有用于检测上述生物标志物的试剂，该试剂为通过酶联免疫吸附、蛋白芯片、免疫印迹或微流控免疫检测样本中所述生物标志物的试剂。本发明通过检测人血清中上述生物标志物的表达水平，可以有效区分贲门腺癌患者和健康人，可用于贲门腺癌的辅助诊断。