本发明属壳寡糖的核磁分析技术领域。本发明针对乙酸、乙酸盐的乙酰甲基与壳寡糖结构中的N‑乙酰基的甲基在核磁氢谱中的质子峰的化学位移相近、难以归属的问题，提供壳寡糖的NMR的波谱归属及脱乙酰度相关指标的测定方法：将干燥的壳寡糖样品分别完全溶解于氘代试剂D2O，然后用NaOD溶液调pH值至5.4‑6.2；分别在两个不同的温度下测试，这两个温度的温差足以引起核磁共振谱图上高场区出现可分辨的化学位移；将化学位移值未发生变化或略向高场移动的质子峰确定为壳寡糖的N‑乙酰基的甲基质子峰HAC，将化学位移值向低场移动的质子峰确定为乙酸的甲基质子峰HA。本发明的归属方法和脱乙酰度的测定方法准确、简便。