本发明涉及一种不用药剂处理的小麦单倍体植株染色体加倍方法，将小麦单倍体植株放入人工气候培养箱中在不同的温度条件下分别进行光、暗交替循环培养，完成春化后，移栽到温室或田间，直至结实，光暗交替循环为两个阶段，第一培养阶段5℃暗培养10小时，7℃光照培养14小时，培养3天；第二阶段9.5~10.5℃条件下，光照培养14小时，在3.5~4.0℃条件下，黑暗培养10小时，直至完成春化。本发明通过控制小麦单倍体植株培养的环境条件，使小麦单倍体植株完成染色体加倍，其加倍效果优于用秋水仙素等药剂处理的效果，同时避免了秋水仙素对操作人员的毒害作用和对环境的污染以及因药剂处理导致的死苗现象，并降低了小麦花培单倍体育种的难度和成本、容易推广应用。