发明授权
- 专利标题： 猪源抗菌短肽的筛选法
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申请号： CN202211221211.9申请日： 2022-10-08
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公开(公告)号： CN115725687B公开(公告)日： 2023-12-12
- 发明人: 师福山 , 李丹月 , 傅心雨
- 申请人： 浙江大学
- 申请人地址： 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
- 专利权人： 浙江大学
- 当前专利权人： 浙江大学
- 当前专利权人地址： 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
- 代理机构： 杭州中成专利事务所有限公司
- 代理商 金祺
- 主分类号： C12Q1/06
- IPC分类号： C12Q1/06 ; C12Q1/02 ; C07K14/47 ; C12N15/70 ; C12N1/21 ; C12N5/10 ; C07K1/14 ; C07K1/34 ; C12N15/85 ; C12R1/19
摘要：
本发明属于生物技术领域，具体涉及猪源抗菌短肽的筛选及初步验证。本发明公开了一种猪源细菌性疾病的新型抗菌制剂——猪源GSDMD抗菌肽。通过构建以pET‑28a‑SUMO为载体的猪GSDMD‑FL、GSDMD‑N(p30)以及GSDMD截短片段的原核表达质粒，转化至BL21(DE3)pLysS感受态细胞，验证猪GSDMD蛋白的杀菌效果并筛选具有抗菌作用的猪GSDMD片段。同时构建相应的以p3×Flag‑CMV‑14为载体的猪GSDMD截短片段真核表达质粒，转染至HEK293T细胞评估截短片段对细胞的毒性影响。最后，通过绘制纯化蛋白抑菌曲线进行其体外杀菌效果的验证。(56)对比文件Siyun Kuang等.Structure insight ofGSDMD reveals the basis of GSDMDautoinhibition in cellpyroptosis.PNAS.2017,第114卷(第40期),第10642-10647页.廖文艳;马得莹;韩宗玺;刘胜旺.重组鸡β-防御素10蛋白的原核表达及其抗菌活性的测定.中国预防兽医学报.2008,(10),第23-27页.
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