公开(公告)号：CN110804624A

公开(公告)日：2020-02-18

申请号：CN201911092741.6

申请日：2019-11-11

申请人： 浙江大学

发明人： 师福山 ,  吕倩 ,  郑梦洁 ,  石玉华

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10

摘要： 本发明公开了一种猪NLRP3炎症小体体外模型的构建方法，包括构建重组质粒pCMV-N-MYC-NLRP3、重组质粒pCMV-N-HA-caspase-1、重组质粒pCMV-N-HA-ASC、重组质粒pCMV-N-MYC-IL-1β；将上述4个重组质粒共转染至HEK293T细胞内，经培养，得猪NLRP3炎症小体体外模型。由于HEK293T细胞本身并不表达NLRP3炎症小体的四个组分蛋白(NLRP3、ASC、pro-caspase-1、pro-IL-1β)，因此体外构建该NLRP3炎症小体的反应平台为后续开展猪相关炎性疾病的研究提供了重要模型。

公开(公告)号：CN116496949A

公开(公告)日：2023-07-28

申请号：CN202310545721.X

申请日：2023-05-16

申请人： 浙江大学

发明人： 师福山 ,  陈楠 ,  任大喜 ,  余泽旭 ,  季暄 ,  章思奕

IPC分类号： C12N1/20 ,  A23K10/18 ,  A23K50/40 ,  A23K10/20 ,  A23K20/174 ,  A23K20/163 ,  A23K10/12 ,  A23K10/22 ,  A23K10/30 ,  A23K10/35 ,  C12R1/01

摘要： 本发明公开了具有宠物抗衰老功效的犬源魏斯氏菌ZJUIDS‑D034及应用。所述魏斯氏菌ZJUIDS‑D034分类命名为魏斯氏菌(Weissella sp.)，保藏编号为CGMCC 27039。本发明分离于健康犬肠道，来源于宿主肠道的益生菌能更好的在宿主肠道内定植，通过DPPH清除率、羟自由基清除能力、还原能力和对D‑半乳糖致衰小鼠干预实验，最终发现本发明具有良好的体外抗氧化能力及对D‑半乳糖致衰老小鼠有着良好的抗衰老作用。此外，本发明还具有良好的酸耐受性、对大多数抗生素敏感，证明本发明有着良好的益生特性。因此，本发明犬源魏斯氏菌ZJUIDS‑D034可在制备犬类抗衰老益生菌制剂中的应用。

公开(公告)号：CN111485000B

公开(公告)日：2022-05-13

申请号：CN202010374137.9

申请日：2020-05-06

申请人： 浙江大学

发明人： 师福山 ,  吕倩 ,  李肖梁

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N15/57 ,  C12N5/10

摘要： 本发明公开了一种猪GSDMD蛋白介导的细胞焦亡模型建立方法：分别构建重组质粒pCMV‑N‑HA‑caspase‑1、重组质粒p3×Flag‑N‑GSDMD‑FL、重组质粒p3×Flag‑C‑GSDMD‑FL；将重组质粒pCMV‑N‑HA‑caspase‑1分别与重组质粒p3×Flag‑N‑GSDMD‑FL、重组质粒p3×Flag‑C‑GSDMD‑FL共转染至HEK293T细胞内，经培养，得两种由猪GSDMD蛋白介导的细胞焦亡模型。本发明为后续猪GSDMD蛋白的生物学功能研究奠定基础，并为相关猪病的治疗提供建议。

公开(公告)号：CN115725687B

公开(公告)日：2023-12-12

申请号：CN202211221211.9

申请日：2022-10-08

申请人： 浙江大学

发明人： 师福山 ,  李丹月 ,  傅心雨

IPC分类号： C12Q1/06 ,  C12Q1/02 ,  C07K14/47 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C07K1/14 ,  C07K1/34 ,  C12N15/85 ,  C12R1/19

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及猪源抗菌短肽的筛选及初步验证。本发明公开了一种猪源细菌性疾病的新型抗菌制剂——猪源GSDMD抗菌肽。通过构建以pET‑28a‑SUMO为载体的猪GSDMD‑FL、GSDMD‑N(p30)以及GSDMD截短片段的原核表达质粒，转化至BL21(DE3)pLysS感受态细胞，验证猪GSDMD蛋白的杀菌效果并筛选具有抗菌作用的猪GSDMD片段。同时构建相应的以p3×Flag‑CMV‑14为载体的猪GSDMD截短片段真核表达质粒，转染至HEK293T细胞评估截短片段对细胞的毒性影响。最后，通过绘制纯化蛋白抑菌曲线进行其体外杀菌效果的验证。(56)对比文件Siyun Kuang等.Structure insight ofGSDMD reveals the basis of GSDMDautoinhibition in cellpyroptosis.PNAS.2017,第114卷(第40期),第10642-10647页.廖文艳;马得莹;韩宗玺;刘胜旺.重组鸡β-防御素10蛋白的原核表达及其抗菌活性的测定.中国预防兽医学报.2008,(10),第23-27页.

公开(公告)号：CN116574650A

公开(公告)日：2023-08-11

申请号：CN202310545734.7

申请日：2023-05-16

申请人： 浙江大学

发明人： 任大喜 ,  陈楠 ,  师福山

IPC分类号： C12N1/20 ,  A23K10/18 ,  A23K50/40 ,  A23K10/20 ,  A23K20/174 ,  A23K20/163 ,  A23K10/12 ,  A23K10/22 ,  A23K10/30 ,  A23K10/35 ,  C12R1/01

摘要： 本发明公开了具有宠物抗衰老功效的犬源粪肠球菌ZJUIDS‑D016及应用，粪肠球菌ZJUIDS‑D016分类命名为(Enterococcus faecalis)，保藏编号为CGMCC 27038。本发明分离于健康犬肠道，来源于宿主肠道的益生菌能更好的在宿主肠道内定植，通过DPPH清除率、羟自由基清除能力、还原能力和对D‑半乳糖致衰小鼠干预实验，本发明提供的犬源粪肠球菌ZJUIDS‑D016具有良好的体外抗氧化能力及对D‑半乳糖致衰老小鼠有着良好的抗衰老作用。此外，本发明还具有良好的酸耐受性和胆盐耐受性、对大多数抗生素敏感，证明本发明有着良好的益生特性。因此，本发明可用于制备宠物犬抗衰老的益生产品。

公开(公告)号：CN111485000A

公开(公告)日：2020-08-04

申请号：CN202010374137.9

申请日：2020-05-06

申请人： 浙江大学

发明人： 师福山 ,  吕倩 ,  李肖梁

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N15/57 ,  C12N5/10

摘要： 本发明公开了一种猪GSDMD蛋白介导的细胞焦亡模型建立方法：分别构建重组质粒pCMV-N-HA-caspase-1、重组质粒p3×Flag-N-GSDMD-FL、重组质粒p3×Flag-C-GSDMD-FL；将重组质粒pCMV-N-HA-caspase-1分别与重组质粒p3×Flag-N-GSDMD-FL、重组质粒p3×Flag-C-GSDMD-FL共转染至HEK293T细胞内，经培养，得两种由猪GSDMD蛋白介导的细胞焦亡模型。本发明为后续猪GSDMD蛋白的生物学功能研究奠定基础，并为相关猪病的治疗提供建议。