本发明提供了一种检测鼠伤寒沙门氏菌的试剂盒的制备方法及试剂盒，属于试剂盒技术领域。本发明通过先制备具有超顺磁性的磁珠，将磁珠作为磁性内核，包被上有机共价骨架(COF)形成核壳结构即MCOF纳米磁性粒子，再利用原位还原法将金纳米粒子负载在MCOF纳米磁性粒子上，最后与鼠伤寒沙门氏菌的适配体偶联合成具有高发射荧光的纳米探针apt‑MCOF‑AuNPs。将鼠伤寒沙门氏菌与纳米探针共孵育形成探针‑菌体复合物，加入淬灭剂Fe3+进行淬灭探针荧光，由于菌体对纳米探针的保护作用和与Fe3+的竞争性结合，探针的荧光不会被Fe3+淬灭，在365nm紫外光照射下，溶液呈明亮的绿色荧光。从而实现鼠伤寒沙门氏菌快速和特异性检测。