本发明属于有机合成领域，具体涉及一种稳定同位素2H（D）标记的25‑羟基维生素D2的合成方法。以丙二酸二乙酯为原料，通过与氘代碘甲烷反应，向其引入氘代甲基，并通过Mitsunobu反应得到关键的砜中间体，含氘代甲基和伯醇侧链的砜中间体经过两次Dess‑Martin氧化和两次甲基锂加成，形成25‑羟基维生素D2关键片段，并再次通过mCPBA氧化成亚砜后通过Julia烯烃合成反应完成烷基片段对接，形成25‑羟基维生素D2上部分骨架，该骨架即可与商业化可购买的25‑羟基维生素D2二烯烃片段对接，对接后的分子经脱保护得到目标分子氘代25‑羟基维生素D2。