本发明公开了一种竞争型草鱼促黄体生成素检测试剂盒及应用。属于生物技术领域。包括：草鱼LHβ抗体、草鱼LHβ蛋白标准品、LHβ示踪剂、涂板液、清洗液、阻断液、催化液、终止液、荧光检测剂A、荧光检测剂B。本发明还公开了检测方法，本发明试剂盒以生物素标记的草鱼LHβ抗原为示踪剂，采用竞争性荧光免疫方法对草鱼促黄体生成素(LH)进行定量检测，具有更高的检测灵敏度和特异性，并且成本低，所得检测数据稳定、准确。可以检测草鱼血清、垂体裂解液或培养液等样品中的促黄体生成素浓度，检测半效应浓度可以达到0.3245ng/mL，为草鱼促黄体生成素的研究提供了有效的检测手段。