本发明公开了一种预防禽呼肠孤病毒的病毒样颗粒疫苗及其制备方法，属于兽用生物制品领域。本发明提供的预防禽呼肠孤病毒的病毒样颗粒疫苗包含编码基因序列如SEQ IDNO.2所示的融合蛋白，并且该融合蛋白可自组装形成病毒样颗粒。本发明还公开了该预防禽呼肠孤病毒的病毒样颗粒疫苗制备方法和应用。本发明的禽呼肠孤病毒的病毒样颗粒疫苗，免疫效果良好，免疫剂量小，能在免疫后14天内产生保护，有效预防禽呼肠孤病毒所造成的疾病。本发明的制备方法简单，能大量制备禽呼肠孤病毒病的抗原蛋白，耗时短，表达量高，大大降低了生产成本，有利于大规模生产。