本发明公开了一种胞外分泌表达的透明质酸裂解酶及其重组菌与应用。本发明提供了一种来源于链球菌噬菌体的透明质酸裂解酶，克隆了其编码基因并在枯草芽孢杆菌体系实现了重组表达，经过信号肽替换后胞外酶活为1.86×104U/mL，蛋白分子量为39.5kDa。酶学性质表征实验表明其为内切酶，能够在pH 5‑8范围内发挥透明质酸降解作用，最适反应pH为6，最适反应温度为40℃，多种金属离子对其具有促进作用。该酶具有良好的热稳定性，pH稳定性。本发明利用优化的培养基，在20‑L发酵罐中进行产酶发酵，重组菌胞外产透明质酸裂解酶的最高活性在40h可达1.07×105U/mL，这是目前为止文献中有关透明质酸裂解酶胞外分泌表达的首次报道。