本发明属于生物合成技术领域，公开了一种麦角硫因的合成方法。该合成方法，以组氨酸为主底物，对甲苯磺酸甲酯为副底物，在EgtD酶和甲基转移酶的催化下，制得组氨酸甜菜碱；然后加入聚硫化物，于St酶的催化下，生成麦角硫因；EgtD酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，甲基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3所示，St酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。本发明提供的合成方法通过对副底物进行选择，对HMT酶、St酶进行筛选，不仅能够避免有毒物质碘甲烷的使用，而且筛选的St酶能够直接催化第一步生成的组氨酸甜菜碱，能够大幅度简化工艺，适于工业放大。