本发明公开了一种ACE抑制肽、制备方法及其应用，涉及生物技术领域，ACE抑制肽从白乌鱼鱼肉中提取得到，氨基酸序列为：Phe‑Leu‑Met‑Phe(FLMF)。ACE抑制肽的制备方法包括：白乌鱼匀浆处理，模拟人体体外消化制备白乌鱼酶解液；对酶解液使用超滤管分离截留分子量小于3000Da的超滤组分；对超滤组分采用凝胶色谱方法进行层析；对层析后得到的组分进行分离纯化。本发明方法制备得到的ACE抑制肽具有较高的ACE抑制率，可应用于调节血压的产品中。