本发明涉及一种表达淀粉麦芽糖酶的重组大肠杆菌及其在制备热可逆凝胶中的应用，涉及生物工程技术领域。本发明在大肠杆菌BL21(DE3)中，以pET‑20b(+)为载体，表达来源于Thermus Thermophilus STB20的淀粉麦芽糖酶，发酵粗酶液的催化活力为3515.11U/mL，通过分离纯化得到酶活为35434.85U/mL的纯酶液，将所得纯酶液添加至含有糊化木薯淀粉的反应体系中，制备得到热可逆凝胶，在淀粉麦芽糖酶添加量为2U/g时，凝胶的强度达到1079.23N。本发明实现了淀粉麦芽糖酶的大肠杆菌胞外生产，得到了酶活力高，热稳定性好的重组淀粉麦芽糖酶，制备得到的热可逆凝胶在加热状态下呈液态，冷却条件下呈凝胶质地，具有良好的应用前景。